诊疗一体化纳米靶向探针在肿瘤中的应用研究

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研究背景恶性肿瘤严重危害全球人类健康。目前存在的传统肿瘤诊疗方法在肿瘤的早期诊断方面存在着各自的局限性,因此新型抗肿瘤方法—多功能纳米靶向探针的诊疗一体化受到广泛关注。目的本文以肿瘤的早期多模态成像及诊疗一体化研究为目的,研发构建多功能诊疗一体化纳米探针并对纳米探针进行表征分析,同时研究该纳米探针在体内外成像的优越性并对治疗效果进行评价,旨在突破传统肿瘤诊疗方法的局限性。方法1)研发制备并表征纳米探针RGD-Au DSNS/si RNA,采用CT成像及热动力学成像方式研究其体内外成像性能,并对其细胞毒性和体外细胞摄取进行定量分析。2)采用CCK8细胞增殖实验、蛋白免疫印迹实验(Western Blot)对纳米探针RGD-Au DSNS/si RNA的体外治疗效果进行评价,通过检测肿瘤生长状况及HE染色实验对纳米探针RGD-Au DSNS/si RNA的体内治疗效果进行评价,包括光热治疗、基因治理及联合治疗评价。3)研发制备并表征纳米探针Cy5.5-Gd-Au DENPs-FA,采用CT、MRI、光学成像方式研究其体内外成像性能,并对其细胞毒性、体外细胞摄取及生物分布进行检测分析。结果1)制备纳米探针RGD-Au DSNS以及RGD-Au DSNS/si RNA人工合成多聚物,通过透射电镜测试得知RGD-Au DSNS颗粒尺寸约55.1nm,紫外分光光度计的实验结果显示800nm处有一个明显的吸收峰。经检测结果表明,该纳米探针具有良好的X线衰减特性及光热转换效率,且在运用过程中具有良好的生物相容性。2)CCK8细胞增殖实验及蛋白免疫印迹实验(Western Blot)结果证明纳米探针RGD-Au DSNS/si RNA体外联合治疗效果比单纯光热治疗、基因治理在抑制肿瘤生长方面效果更佳。肿瘤生长状况及HE染色实验结果证明联合治疗效果比单纯地光热治疗、基因治疗效果更显著。3)研发并制备纳米探针Cy5.5-Gd-Au DENPs-FA,表征结果显示该纳米探针在280nm和650nm左右出现了明显的吸收峰,证实树状大分子表面修饰了FA和Cy5.5,且该探针的金核的粒径为4.0±1.3nm,水合粒径平均值在126.0nm左右。通过成像实验结果得出该探针可完成CT、MRI及光学三模态成像,且TEM实验及生物分布实验证明体内外成像是由Cy5.5-Gd-Au DENPs-FA内化在细胞内而产生的增强效果。结论本研究成功构建多功能的诊疗一体化纳米探针并完成了研究探针的多模态成像,同时评价了该研究探针的治疗效果,一提高了肿瘤诊断的精准性,实现了对于早期肿瘤的诊疗一体化研究,为今后早期肿瘤的精准诊断与个体化治疗奠定了坚实的基础。
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