重组FN肝素结合域多肽对人胰腺癌细胞株bxpc-3侵袭转移能力的影响

来源 :福建医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:kukakei
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目的:研究重组人纤维连接蛋白N端和C端肝素结合域多肽(rh FNHN29和rh FNHC36)对人胰腺癌细胞bxpc-3体内外侵袭转移能力的影响,并探讨其可能的机制。研究方法和内容:1、通过粘附实验检测rh FNHN29和rh FNHC36对人胰腺癌细胞株bxpc-3粘附能力的影响;2、通过Transwell小室法检测rh FNHN29和rh FNHC36对人胰腺癌细胞株bxpc-3迁移和侵袭能力的影响;3、通过Western Blot测定rh FNHN29和rh FNHC36对人胰腺癌细胞株bxpc-3相关整合素αV、β1等蛋白表达量的影响;4、通过ELISA法测定rh FNHN29和rh FNHC36对人胰腺癌细胞株bxpc-3基质金属酶9活性的影响;5、利用尾静脉接种荧光素酶标记的bxpc-3细胞建立胰腺癌血行肺转移模型,研究rh FNHN29和rh FNHC36对bxpc-3细胞在裸鼠体内血行肺转移的影响。结果:1、经不同浓度rh FNHN29(100μg/ml、200μg/ml、400μg/ml)处理的bxpc-3细胞对FN的粘附率分别为89.44±5.38%、79.17±3.56%、75.96±3.99%,经不同浓度rh FNHC36(100μg/ml、200μg/ml、400μg/ml)处理的bxpc-3细胞对FN的粘附率分别为75.99±4.34%、69.69±3.14%、60.91±0.31%,均明显低于对照组(将对照组的OD值换算成粘附率为100%),差别具有统计学意义(P<0.05);经不同浓度rh FNHN29(100μg/ml、200μg/ml、400μg/ml)处理的bxpc-3细胞对基质胶的粘附率分别为88.73±7.26%、77.25±9.37%、52.92±3.22%,经不同浓度rh FNHC36(100μg/ml、200μg/ml、400μg/ml)处理的bxpc-3细胞对基质胶的粘附率分别为65.82±3.75%、58.44±2.33%、44.73±3.39%,rh FNHN29中、高浓度组以及rh FNHC36各浓度组均明显低于对照组(将对照组的OD值换算成粘附率为100%),差别具有统计学意义(P<0.05)。2、经不同浓度rh FNHN29(100μg/ml、200μg/ml、400μg/ml)处理的bxpc-3细胞迁移数[单位:个]分别为21±2、13±2、9±2,经不同浓度rh FNHC36(100μg/ml、200μg/ml、400μg/ml)处理的bxpc-3细胞迁移数[单位:个]分别为19±4、11±2、8±2,均明显低于对照组(37±8),差别具有统计学意义(P<0.01);经不同浓度rh FNHN29(100μg/ml、200μg/ml、400μg/ml)处理的bxpc-3细胞侵袭数[单位:个]分别为23±3、13±3、9±1,经不同浓度rh FNHC36(100μg/ml、200μg/ml、400μg/ml)处理的bxpc-3细胞侵袭数[单位:个]分别为23±9、14±2、7±3,仅rh FNHN2及rh FNHC36中、高浓度组明显低于对照组(30±7),差别具有统计学意义(P<0.05)。3、经不同浓度rh FNHN29(100μg/ml、200μg/ml、400μg/ml)处理的bxpc-3细胞的整合素αV的表达分别为0.37?0.02、0.34?0.01、0.27?0.01,经不同浓度rh FNHC36(100μg/ml、200μg/ml、400μg/ml)处理的bxpc-3细胞的整合素αV的表达分别为0.34?0.02、0.27?0.01、0.17?0.01,均明显低于对照组(0.47?0.03),差别具有统计学意义(P<0.01);经不同浓度rh FNHN29(100μg/ml、200μg/ml、400μg/ml)处理的bxpc-3细胞的整合素β1的表达分别为0.38?0.01、0.33?0.03、0.23?0.02,经不同浓度rh FNHC36(100μg/ml、200μg/ml、400μg/ml)处理的bxpc-3细胞的整合素β1的表达分别为0.43?0.02、0.26?0.01、0.19?0.01,均明显低于对照组(0.76?0.04),差别具有统计学意义(P<0.01)。4、rh FNHN29组和rh FNHC36组裸鼠的肺肿瘤光子总数(单位:p/s)分别为5.97E7?3.52E7、6.99E7?4.70E7,均明显低于PBS对照组(4.96E8?2.52E8),差别具有统计学意义(P<0.01)。结论:rh FNHN29和rh FNHC36均能抑制胰腺癌细胞bxpc-3的体外的粘附、迁移、侵袭能力,并且可在裸鼠体内抑制bxpc-3细胞向肺转移;rh FNHN29和rh FNHC36可能通过抑制整合素αVβ1、基质金属酶9的表达来发挥作用。
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