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隐睾症是男子泌尿生殖系统中常见的疾病，多为单侧发生，它可导致男子生育能力低下，是男子不育的重要原因。目前认为隐睾对睾丸生精功能的影响是由于异位睾丸处在高于阴囊的温度之中，使睾丸的各级生精细胞、支持细胞和间质细胞发生退化而造成的。近期的研究表明，单侧隐睾对侧的睾丸存在与隐睾同样的生精损害，其详细机制仍不十分清楚。 生殖股神经(Genitofemoral nerve,GFN)起源于第1、2腰丛，其纤维分布于提睾肌、引带和睾丸鞘膜，是睾丸最重要的传入神经。睾丸和附睾也有内脏神经支配。支配它的内脏神经来源于环绕其动脉周围的神经丛，属于交感神经性质。降钙素基因相关肽(Calcitonin gene-related peptide,CGRP)是由降钙素基因编码的mRNA选择性拼接后转录而成的37个氨基酸组成的单链多肽，是全身最主要的扩张血管的神经活性多肽。睾丸中氧自由基(Reactive free species,ROS)的产生和清除平衡对生精过程十分重要。丙二醛(MDA)是ROS和生物膜不饱和脂肪酸发生脂质氧化反应的代谢产物，其含量的变化可以反应ROS在组织中的含量。抗氧化物质可以把ROS控制在一定的水平，它主要包括抗氧化酶如铜／锌超氧化物歧化酶(Copper／zine-superoxide dismutase,Cu／Zn SOD)，谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione peroxidase,GPX)和过氧化氢酶(Catalase,CAT)，以及还原型谷胱甘肽(L-r-glutamyl-L-cysteinylglycine,GSH)。GSH是由谷氨酸、胱氨酸及甘氨酸组成的一种天然含巯基的三肽，在细胞的生理过程中，包括蛋白质和DNA的合成，以及氨基酸的转运等，GHS起十分重要的作用。另外，GSH是体内重要的抗氧化物质，它能使细胞免受多种有害物质，包括氧化剂、亲电子物质等的伤害。 本课题利用大鼠建立单侧隐睾和单侧隐睾加GFN切断二种模型，从神经分子学方面和抗氧化酶的基因表达水平来研究单侧隐睾对侧睾丸的损害机制和GSH在单侧隐睾双侧睾丸中含量的变化及其外源性GSH对睾丸保护作用，为临床对该病的发生和并发症的防治提供新的思路。 材料与方法:1、SD雄性大鼠(21日龄)60只随机分为4组。(1)对照组20只; (2)单侧隐翠组20只;(3)隐皋+GFN切断组10只;(4)隐辜十注射GSH组10只。并复制成两种模型。三月后处死大鼠取单侧或双侧辜丸作标本并用天平称重。2、采用免疫组化技术观察单侧隐辜对侧翠丸中CGR卫阳性细胞的神经分布和含量;3、采用逆转录聚合酶链反应(RT一PCR)方法检测GPX、C侧Zn一SOD、CAT mRNA的表达;4、采用化学比色法测定双侧皋丸中GSH和MDA的含量;5采用生物素一dUTP酶标亲和素测定法检测翠丸生殖细胞的凋亡;6、采用光学显微镜观察翠丸HE染色切片和透射电镜观察辜丸支持细胞的超微结构。 结果:1、正常对照组翠丸间质中含有丰富的CGRP免疫反应阳性细胞的神经纤维，它主要沿血管周围分布，这种血管平滑肌较厚，管腔内径较大，内皮细胞完整。组织切片见辜丸曲细精管密聚，生精上皮完整，各级生精细胞排列有序，内有许多精子。2、与对照组比较，单侧隐翠对侧翠丸中含CGRP阳性的神经细胞分布及含量明显降低(P<0.01)，其支配血管的内径缩小，平滑肌变薄;GPX和C口Zn一SOD mRNA的表达、 GSH的含量和皋丸重量也明显降低(P<0.01);CAI，mRNA的表达无显著性改变(P>.05);，MDA和生殖细胞凋亡指数(AI)则明显升高(P<0.01)，MDA与Al存在正相关(r=0.786，P<0.05);组织切片见翠丸曲细精管稀疏，精子稀少，生精上皮变薄;透射电镜见支持细胞超微结构出现病理改变，包括线粒体和滑面内质网扩张、呈空泡样变性和溶酶体聚积等。3、单侧隐辜+GFN切断后，与隐辜组比较，其对侧卑丸中CGRP的分布和含量明显上升，MDA的含量和Al则明显下降(P<0.01)，组织切片和透射电镜见生精上皮和支持细胞的病理变化明显改善。4、隐攀+GSH注射组和隐辜组比较，其双侧皋丸重量与GSH的含量则明显上升，MDA和Al明显下降(p<0 .01)。生精上皮和支持细胞的病理改变也明显改善。 结论:(1)单侧隐翠对侧皋丸存在生精上皮的损害，表现在ROS升高，脂质过氧化增加，生殖细胞和Sertoli细胞变性凋亡增加，说明攀丸中存在有氧化应激，它是翠丸生精功能抑制的直接原因之一。2、聚丸中有大量含CGRP的神经细胞，它们主要沿攀丸血管周围分布。3、单侧隐攀对侧梁丸生精功能的损害机制是由于隐皋的异位持续刺激通过GFN传入到对侧交感神经中枢反射性引起对侧CGRP的降低，而CG即的降低，使辜丸的血流灌注下降，缺血缺氧造成ROS的升高;同时CGRP的降低，使其对细胞的保护作用下降，促使辜丸生殖细胞和支持细胞的变性凋亡;切断GFN即阻断传入神经可以减轻这种损害。4、单侧隐翠对侧辜丸中抗氧化酶GPX和C侧Zn一SODmRNA表达明显下降，而CAT mRNA表达变化不大，同时还存在GSH的含量下降，说明单侧隐攀对侧翠丸存在抗氧化能力下降。翠丸中清除ROS主要的抗氧化物质可能是抗氧化酶GPX和Cu/Zn一SOD以及GSH。5、单侧隐翠双侧辜丸中GSH含量下降，GSH主要由支持细胞合成与分泌的。6、外源性GSH可以增加单侧隐翠双侧翠丸中GSH的含量，降低ROS，减轻脂质过氧化，对双侧辜丸的生精上皮有一定的保护作用。