目的：⑴鉴定结核分枝杆菌抗原PPE68和MPT63特异性HLA-A*0201限制性CTL表位；⑵探讨所鉴定的CTL表位在活动性肺结核疾病中的诊断应用价值。　　方法：①候选CTL表位的合成：采用T细胞表位预测软件SYFPEITHI和PAProc预测结核分枝杆菌独有抗原PPE68和MPT63中潜在的受HLA-A*0201限制的CTL表位。②候选CTL表位和HLA-A*0201分子的结合力的研究：基于T2细胞株，采用MHC-肽复合物稳定性实验检测候选CTL表位和HLA-A*0201分子的结合力。③单个CTL表位免疫HLA-A*0201转基因小鼠，采用ELISPOT检测小鼠脾单个核细胞和淋巴结细胞内CTL表位特异性分泌IFN-γ的T细胞的频率，采用CTL杀伤实验检测小鼠脾细胞（效应细胞）杀伤负载CTL表位的脾单个核细胞的效应。④基于HLA-A*0201阳性结核分枝杆菌感染者及健康志愿者外周血单个核细胞（PBMC），采用酶联免疫斑点实验（ELISPOT）检测PBMC中CTL表位、ESAT-6和CFP-10特异性分泌IFN-γ的T细胞的频率，进而确定结核分枝杆菌特异性CTL表位在诊断肺结核中的敏感性和特异性。　　结果：⑴基于预测得分及序列在结核分枝杆菌中的保守性，选择14条PPE68源性潜在受HLA-A*0201限制的候选CTL表位（PPE6837-45（ALDAQAVEL），PPE685-13（AMPPELNTA），PPE6844-52（ELTARLNSL），PPE68148-156（ALAMEVYQA），PPE6826-34（AAAAGWQTL），PPE68133-141（ALTEMDYFI），PPE68166-174（KLEPMASIL），PPE68126-134（GINTIPIAL），PPE6864-73（ALAAATPMVV），PPE68299-308（QLPPAATQTL），PPE68105-114（SLPEIAANHI），PPE68140-149（FIRMWNQAAL），PPE68277-286（LIEKPVAPSV）， PPE68200-209（LLRAESLPGA）。）和10条MPT63源性潜在受HLA-A*0201限制的候选CTL表位（MPT635–14（TMIKTAVAVV），MPT6310–19（AVAVVAMAAI），MPT6318–26（AIATFAAPV），MPT6320–28（ATFAAPVAL），MPT6329–37（AAYPITGKL），MPT6342–50（MTDTVGQV），MPT6351–59（VLGWKVSDL），MPT6374–82（QVWEATATV），MPT6384–93（AIRGSVTPAV），MPT63146–154（AMNNGMEDL）。），委托生物公司合成，纯度大于95％。⑵在13条PPE68源性的HLA-A*0201高结合力肽中，除PPE6837–45和PPE6844–52外，其它11条CTL表位免疫的HLA-A*0201转基因小鼠的脾和淋巴结细胞内均存在表位特异性分泌IFN-γ的T细胞，这些效应细胞能够杀伤负载相同CTL表位的脾单个核细胞和淋巴结细胞。14条候选表位中，PPE68299–308免疫的转基因小鼠中脾单个核细胞和淋巴结细胞中表位特异性分泌IFN-γ的细胞的频率最高[（307±23）SFCs/5×105脾单个核细胞；（174±21）SFCs/2×105淋巴结细胞]。⑶在5条MPT63源性HLA-A*0201高结合力肽中，MPT6318–26免疫HLA-A*0201转基因小鼠诱导产生了最高水平的表位特异性分泌IFN-γ的T细胞反应[（126±20） SFCs/2×105脾单个核细胞，(79±12)SFCs/2×105淋巴结细胞]。MPT6318–26特异性T细胞对负载CTL表位的脾单个核细胞的杀伤率最高（效靶比E:T=10:1时，杀伤率为57.93±9.46%），但是其他的肽未诱导显著性的免疫反应。⑷在14条PPE68源性肽中，9条候选表位（PPE68148–156，PPE68133–141，PPE68166–174， PPE68126–134，PPE6864–73，PPE68200–209，PPE68105–114，PPE68140–149和PPE68277–284）都可以被至少50%的结核分枝杆菌感染者的PBMC识别，表现为PBMC中存在高水平上述肽特异性分泌IFN-γ的T细胞。88%和84%的人的PBMC可以识别ESAT-6和CFP-10。（2）在10条MPT63源性肽中，5条候选表位（MPT635–14，MPT6318–26，MPT6342–50， MPT6374–82，MPT6384–93）分别被63%、73%、45%、60%和68%被结核分枝杆菌感染者PBMC识别，表现为PBMC中存在高水平的上述肽特异性分泌IFN-γ的T细胞。70%和73%的人的PBMC可以识别ESAT-6和CFP-10。　　结论：①17条候选表位（PPE685-13、 PPE68148-156、PPE6826-34、 PPE68133-141、PPE68166-174、PPE68126-134、PPE6864-73、 PPE68299-308、PPE68105-114、PPE68140-149、PPE68277-286、PPE68200-209、MPT635–14、 MPT6318–26、 MPT6342–50、 MPT6374–82、 MPT6384–93）为结核分枝杆菌抗原源性HLA-A*0201限制性CTL表位。②9条CTL表位（PPE68126–134、PPE68133–141、PPE68140–149、PPE68148–156、MPT635–14、MPT6318–26、MPT6342–50、MPT6374–82、MPT6384–93）在活动性肺结核诊断中具有潜力和价值。