论文部分内容阅读
1.研究背景卵巢癌是女性常见肿瘤之一,而且也是死亡率最高的妇科肿瘤,发病机制目前仍不明确。癌基因的异常活化或者抑癌基因的失活在肿瘤的发生发展中起到关键作用。过氧化物酶(PXDN)与肾脏纤维化和肿瘤等许多疾病发生发展密切相关。PXDN在卵巢癌尤其是浆液型卵巢癌中的功能和相关作用机制尚不清楚,本研究旨在探究PXDN在卵巢癌中功能和潜在的作用机制。2.研究目的(1)明确PXDN在卵巢癌中的临床意义;(2)明确PXDN是否影响卵巢癌细胞增殖和侵袭作用;(3)初步探究PXDN如何促进卵巢癌细胞增殖、侵袭和转移3.研究方法(1)我们通过TCGA和Kaplan-Meier Plotter等数据库比较PXDN在正常卵巢组织与卵巢癌组织中的表达差异以及预后情况,以及评价PXDN潜在的临床意义。并且我们通过免疫组化方法,验证PXDN在浆液型卵巢癌组织中的表达。(2)我们通过RT-PCR和Western bloting方法验证卵巢癌细胞系中PXDN表达情况。我们通过siRNA干扰PXDN在卵巢癌细胞系SKOV3和OV15细胞中的表达,进一步我们利用CCK8增殖实验和克隆形成实验检测PXDN对卵巢癌细胞增殖和耐药的影响;然后我们通过空穿和划痕实验检测PXDN对卵巢癌细胞SKOV3和OV15的侵袭转移功能的影响。(3)我们利用RT-PCR和Western bloting方法检测促进卵巢癌细胞增殖和侵袭关键分子机制。4.研究结果(1)我们通过分析TCGA数据库中212012-at芯片PXDN表达情况,与8例正常卵巢组织样本相比,586例浆液性卵巢癌样本中PXDN表达显著升高。我们通过kaplan-meier plotter数据库分析212012-at中PXDN表达情况与患者无进展期生存期和总生存期之间的关系,发现与720例低表达相比,715例高表达组的患者无进展生存期显著缩短(P<0.00l);与828个例低表达相比,828例高表达组的患者总生存期显著缩短(P<0.001)。(2)免疫组化结果提示:良性卵巢囊肿中PXDN高表达11例,低表达126例,浆液性卵巢癌组:PXDN高表达55例,低表达24例,通过统计学分析发现:良性卵巢囊肿与浆液性卵巢癌PXDN的表达具有统计学意义(p<0.001)。我们又分析了病理分级与PXDN表达情况的关系,把病理分级分为高级别(低表达7例,高表达33例)和低级别(低表达17例,高表达22例),使用卡方X2统计学分析表明,PDXN与卵巢癌病理分级成正相关P=0-012。(3)我们利用siRNA干扰PXDN的表达后,结果显示干扰组的卵巢癌SKOV3和OV15细胞增殖、侵袭转移能力显著抑制,本研究发现干扰PXDN表达后,卵巢癌细胞对顺铂或紫杉醇的耐药性无影响。(4)本研究发现,PXDN促进卵巢癌增殖侵袭转移的分子机制视是通过促进TGF-β通路中Snaill和Smad4的表达以及Smad2和Smad3的活化。5.结论(1).PXDN在浆液性卵巢癌组织中表达显著升高,具有作为预后标记物的潜在价值。(2)干扰PXDN表达可抑制卵巢癌细胞的增殖、迁移的能力。(3)PXDN抑制卵巢癌侵袭转移的分子机制与其抑制Snaill和Smad4的表达以及Smad2和Smad3的失活相关。