目的:探讨烟草浸液(smokeless tobacco extracts,ST)对人牙龈成纤维细胞(human gingival fibroblasts,HGFs)在纯钛表面粘附、增殖的影响及其机制,为临床上如何提高吸烟患者种植成功率奠定理论基础。方法:1.用改良酶消化法体外原代培养HGFs。2.采用免疫组化SP法鉴定HGFs,并绘制细胞生长曲线。3.用金相砂纸逐级打磨制备好的钛片,测量表面粗糙度后在金相显微镜下观察其表面微观形貌。4.CCK-8法检测ST干预后HGFs在钛片表面粘附率的变化。5.CCK-8法检测ST对HGFs在钛片表面长期增殖的影响。6.ELISA法检测ST对HGFs在钛片表面纤维连接蛋白(fibronectin,FN)产生的影响。结果:1.原代细胞呈梭形,SP染色结果显示细胞抗波形丝蛋白染色阳性,抗角蛋白染色阴性,证实为HGFs。2.钛片表面粗糙度测量值为:Ra=(0.187±0.031)μm,镜下见打磨均匀一致,适合细胞生长。3.CCK-8实验显示,HGFs在钛片上的粘附率随ST浓度升高呈下降趋势,ST浓度高于5.0 g/L时抑制作用明显(p<0.01)。4.CCK-8法检测结果表明,ST以时间依赖性和浓度依赖性抑制HGFs在钛片上的增殖。5.ELISA法结果表明,随浓度和天数增加,ST抑制细胞产生FN的作用逐渐增强,其中2.5 g/L ST组抑制作用更强、时效更长(p<0.01)。结论:1.本实验成功体外培养HGFs,细胞生长旺盛、性状稳定。2.ST能抑制HGFs在钛片上粘附和增殖,其机制可能与细胞产生FN减少相关。