灵芝菌株诱变及新菌株液态发酵米糠麸皮全料的研究

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灵芝(Ganoderma lucidum)是一种具有多种活性物质和药理作用的药食两用大型真菌,在食品、药品、化妆品等方面均有应用。米糠麸皮作为我国主要的农产品加工副产物,来源广泛但利用率较低,高效高值化利用途径有待拓展。本研究通过诱变对灵芝进行菌种改良,获得一株性能更优的灵芝新菌株,并利用新菌株液态发酵,生物转化米糠麸皮,生产具有生物活性的灵芝菌丝和多糖,提供一种高值化利用米糠麸皮、高产灵芝菌丝和多糖的新方法。本研究主要内容及结果如下:⑴对灵芝Ganoderma lucidum JSU LIU1进行紫外诱变,筛选出一株生长速率更快且生物转化米糠麸皮效率更高的诱变株Ganoderma lucidum JSU LIUYU18。灵芝诱变株液态发酵所得菌丝干重为2.321 g/100mL、菌丝多糖为124.169 mg/100mL、胞外多糖为410.029 mg/100mL、残渣为0.715 g/100mL,与原始菌株相比分别提高了16.1%、15.5%、18.0%,底物利用率提高了7.6%。并通过拮抗性试验和ITS基因测序鉴定Ganoderma lucidum JSU LIUYU18为一株灵芝新菌株。⑵对灵芝Ganoderma lucidum JSU LIUYU18液态发酵培养基进行优化。以培养基各组分设计单因素和U11(113)均匀试验,得到灵芝Ganoderma lucidum JSU LIUYU18液态发酵优化培养基为每100 mL培养基中含1 g米糠、9 g麸皮及0.25 g七水硫酸镁,此时菌丝干重为4.261 g、菌丝多糖为450.127 mg、胞外多糖为1141.416mg、残渣干重为1.362 g。⑶构建灵芝Ganoderma lucidum JSU LIUYU18液态发酵菌体生长动力学模型。对培养基各组分及发酵时间设计U24(244)均匀试验,通过SPSS回归分析得到灵芝Ganoderma lucidum JSU LIUYU18菌体生长经验动力学模型方程。根据此模型方程,计算出不同条件下菌丝干重预测值,利用SPSS非线性回归及U16(163)均匀试验设计得到Logistic方程参数μm和Cx,max的表达式,即可得灵芝Ganoderma lucidum JSU LIUYU18液态发酵菌体生长理论动力学模型方程。⑷检测灵芝菌丝安全性及多糖抗氧化活性。根据国标推荐方法测定发酵所得灵芝菌丝中污染物含量。其中重金属含量为铅0.365 mg/kg、镉0.0698 mg/kg、汞0.0122mg/kg、砷0.438 mg/kg、铜6.55 mg/kg、铬21.8 mg/kg,黄曲霉毒素和农药残留未检出。从灵芝菌丝体中分离纯化得到的灵芝多糖经碘-碘化钾反应、茚三酮反应和Molish反应定性分析为不含淀粉、氨基酸和肽的粗多糖。测定灵芝多糖DPPH·、·OH和O2·ˉ清除力及总还原力,结果表明所得灵芝多糖具有一定体外抗氧化活性。
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