RGD/二硫化钼/阿霉素靶向纳米载药体系的制备及体外抗肿瘤活性研究

来源 :广西医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:gracexiu
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目的:制备一种集靶向释放、化疗和热疗于一体的具有良好生物相容性的纳米载药体系——RGD/二硫化钼/阿霉素复合物,增强对肿瘤细胞的杀灭作用并减少药物的毒副作用。方法:本研究采用合成的MoS2纳米片为基底材料,通过对MoS2进行靶向修饰及共价负载抗肿瘤药物阿霉素(DOX),得到RGD/MoS2/DOX纳米载药体系,实现靶向化疗和热疗双重效应的联合,增强对肿瘤细胞的杀灭作用。实验方法包括:(1)通过水热法合成MoS2纳米片,利用硫辛酸聚乙二醇羧酸修饰MoS2,通过酰胺反应连接上具有靶向性的RGD多肽(精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸),再连接上交联剂3-(2-吡啶二硫代)丙酸N-琥珀酰亚胺酯(SPDP),得到药物载体MoS2-PEG-RGD-SPDP(MPRS)。得到MPRS进一步与巯基化的DOX反应,形成MPRS-DOX复合物。(2)采用诸多表征手段对制备的纳米材料进行表征。分析MPRS的光热性能、稳定性和生物相容性,评价MPRS-DOX的载药量、释药性能和靶向性以及研究MPRS-DOX纳米载药体系热疗和化疗联合体外抗肿瘤的作用。结果:(1)本研究成功制备了MoS2纳米片。(2)FT-IR、XPS、UV-vis光谱测试表明成功合成MPRS-DOX纳米载药体系,载药实验结果表明,当MPRS:DOX的投料质量比为1:1时,载药效果较理想,MPRS的载药量为53.5%,载药效率为86.8%。进一步地,在药物释放实验中,由于GSH可以还原纳米载药体系中的二硫键,导致DOX释放,在10 m M GSH且p H=5.5条件下,DOX释放量最多。(3)MPRS的光热实验结果表明MPRS具有良好的光热转化效能及光热稳定性,光热性能与MPRS浓度以及近红外光功率大小呈正相关性。(4)细胞毒性结果显示MPRS与H9c2、VSMC、MCF-7以及Hela细胞作用48 h后,细胞存活率均高于80%,表明MPRS生物相容性好。靶向性实验结果显示Hela细胞对MPRS-DOX的摄取强于H9c2细胞和MCF-7细胞,表明MPRS-DOX对Hela细胞具有较好的靶向性。(5)MPRS-DOX中DOX浓度为10μg/m L时,与Hela细胞共培养48 h后,Hela细胞的存活率为22.23±1.22%;当结合热疗后,Hela细胞的存活率仅为8.9±1.42%,表明MPRS-DOX对Hela细胞具有热疗和化疗的协同杀灭作用。细胞凋亡实验以及划痕实验进一步验证了热疗和化疗联合体外抗肿瘤具有协同作用。结论:制备的MPRS-DOX纳米载药体系在体外可实现主动靶向化疗和热疗联合抗肿瘤效应并有效减少药物的毒副作用,为设计高效低毒的抗肿瘤纳米药物提供了一种研究思路。
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