为研究小肠潘氏细胞在小鼠弓形虫病发病过程中的作用,阐明弓形虫卵囊入侵机体的机制。本实验以健康昆明小鼠为研究对象,实验组小鼠灌胃10~4个弓形虫卵囊/只小鼠,建立昆明小鼠急性弓形虫病模型。分别在灌胃后1d、3d、5d、6d观察小鼠临床症状和病理变化。并分别取十二指肠、空肠、回肠前段、回肠中段、回肠后段和大肠各段固定,采用H&E方法和免疫组织化学方法对小鼠感染弓形虫病期间肠道的病变、小肠潘氏细胞及其颗粒和溶菌酶的变化以及弓形虫在小肠的分布和数量进行研究。主要研究结果如下:1、健康小鼠灌胃弓形虫卵囊后,肠系膜淋巴结均可见速殖子。灌胃5天后(day after inoculation,DAI),小鼠被毛凌乱,弓背,皮肤发绀,消瘦,死亡。说明成功建立了昆明小鼠急性弓形虫病模型。2、病理组织学变化:1 DAI,未见明显病理变化。3 DAI,回肠固有层增厚,淋巴细胞浸润。回肠后段绒毛充血和轻度炎症。小肠隐窝基底部聚集的潘氏细胞明显增多,潘氏细胞顶端的嗜酸性颗粒丰富。5 DAI,小鼠小肠淋巴滤泡内淋巴细胞坏死,固有层增厚,毛细血管充血严重。回肠后段肠黏膜萎缩,坏死脱落。绒毛上皮细胞变性,胞质空泡状。潘氏细胞大量减少,残留的潘氏细胞内颗粒变碎小。6 DAI,回肠特别是后段固有结构消失。十二指肠和空肠绒毛上皮坏死脱落,潘氏细胞大量消失。大肠黏膜层细胞坏死,肠腺破坏,淋巴细胞浸润。小肠的HI评分结果显示,5 DAI和6 DAI小肠组织损伤显著比前3天严重。3、卵囊灌胃昆明小鼠后,隐窝、潘氏细胞及其颗粒的变化结果:小肠各段隐窝总数、含PCs的隐窝数量、横断面PCs总数、横断面颗粒总数、单个隐窝中的PCs数量及单个PC中的颗粒数都呈先增高后减少的趋势,多在3 DAI表现高峰,6 DAI最少。其中回肠后段表现最明显,6 DAI减少后的各参数的量与对照组差异显著(p<0.05)。4、弓形虫免疫组织化学染色结果显示:随着感染时间的增加,弓形虫在小肠各段中的阳性面积呈增大趋势,6 DAI面积最大,与1 DAI,3 DAI相比差异显著(p<0.05)。昆明小鼠回肠后段的虫体明显多于其他肠段。1 DAI,单个或多个虫体出现于回肠后段肠绒毛和固有层内,3 DAI单个或多个虫体散布于小肠黏膜层。5 DAI和6 DAI回肠后段阳性虫体或分泌物成团或成片分布于肠道各层。黏膜层最多,损伤也最严重。黏膜下层次之。5、随着感染时间的延长,小肠各肠溶菌酶的数量呈先增加后减少的趋势,3 DAI最多,5 DAI和6 DAI较少,仅回肠后段5 DAI与对照组比较差异显著,其他实验组与对照组相比差异都不显著。结论:本实验通过建立昆明小鼠急性弓形虫病模型,发现昆明小鼠感染弓形虫卵囊后,潘氏细胞及其颗粒呈动态变化,并最终消失的结果,说明弓形虫小肠潘氏细胞具有明显的影响作用,为进一步研究潘氏细胞缺失在弓形虫病发病过程中的作用机制提供理论基础,同时也为以小肠潘氏细胞为基础的弓形虫病的防治提供了实验依据。