叶下珠化学成分及鞣花酸制备工艺研究

来源 :浙江工业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yinzheng1974
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叶下珠是常见于我国南方地区的植物,富含鞣质类化合物。本文以叶下珠为研究对象,基于超高效液相色谱和串联四极杆飞行时间质谱等分析手段,建立并优化了一种适用于叶下珠鞣质提取物分离分析的超高效液相色谱方法,并应用UPLC-QTOF-MS/MS技术对叶下珠乙酸乙酯提取物的化学成分进行了初步定性研究。进一步使用液质联用结合化学计量学的方法,对叶下珠根、茎、叶及果实四个部位的差异性化学成分进行指认。同时探索了一种从叶下珠中分离制备鞣花酸的球磨辅助提取方法,为叶下珠的综合利用提供参考。本论文由绪论和研究报告两部分组成,其中研究报告分为三部分,具体内容如下:
  第一部分:建立了叶下珠鞣质提取物的制备方法,获得的鞣质提取条件为:提取溶剂为50%乙醇水溶液,在30℃下超声提取30min,旋转蒸发去除溶剂得粗提物,并依次用水、石油醚和乙酸乙酯萃取,乙酸乙酯层即为目标层。建立并优化了叶下珠乙酸乙酯提取物的超高效液相色谱分析条件,并进行方法学验证。结果显示,该方法具有良好的精密度、重复性、准确度和稳定性,可用于叶下珠鞣质提取物的分离分析。
  第二部分:采用UPLC-QTOF-MS/MS技术对叶下珠乙酸乙酯提取物进行分析,共检测到50个化合物,其中有45个化合物被初步鉴定或表征,包括31个可水解鞣质类化合物、7个黄酮类化合物、3个酚酸类化合物、2个香豆素类化合物、1个木脂素类化合物和6个其他类化合物。可水解鞣质类化合物又包括18个鞣花鞣质、10个没食子鞣质和3个其他类鞣质。此外,采用UPLC-QTOF-MS结合多元统计分析方法探究了叶下珠根、茎、叶以及果实4个部位之间的化学成分差异性,并对造成差异性的11个化合物进行了指认。
  第三部分:鞣花鞣质是叶下珠中的主要成分,可在特定条件下转化为鞣花酸,鞣花酸是叶下珠发挥药效的重要活性成分之一。本研究以叶下珠为原料,建立了一种分离纯化鞣花酸的球磨辅助提取方法。通过行星式球磨仪对原料进行细胞破壁,经超声提取和酸化后得鞣花酸粗品,再经XDA-8D大孔吸附树脂进行分离纯化,每1g原料可得淡黄色产品10.2mg,UPLC含量测定结果显示其含量大于97%。该研究可为叶下珠的综合利用提供科学依据。
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