银杏叶有效成分的提纯工艺及分析检测

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文中以银杏叶粗提物为原料,寻求提纯银杏叶有效成分—内酯和黄酮两类化合物的有效方法.通过试验和研究,确定以超临界流体萃取结晶技术与溶剂萃取技术的组合工艺,该工艺是能够实现连续化工业生产的可操作方式.主要包括以下几点:1.通过溶剂萃取法选择适宜的萃取剂.主要根据极性相似原理和溶解度参数理论,选择对银杏叶有效成分选择性大、萃取率高的溶剂.研究表明有三种混合溶剂萃取内酯效果较佳,其中乙醇/乙酸乙酯为3/7的混合溶剂初步富集内酯能将纯度从7﹪提高到35﹪,为超临界CO<,2>萃取结晶工艺提供内酯粗品.95﹪正丙醇水溶液萃取黄酮效果最佳,能得到纯度>34﹪的黄酮产品.2.通过对比试验,完成超临界流体萃取结晶工艺提纯银杏叶有效成分适用的管线改造.包括选择动态进料操作下的进料路线;改造萃取器内件结构格进料管结构.改造后的萃取器内件采用结构3,进料管结构采用方式3,工艺流程是:料液用泵2输送到萃取器Ⅱ底部,与从底部上升的SC—CO<,2>接触,溶有萃取物的高压气体经节流阀节流,使其降压将溶质析出,并进入分离器,CO<,2>循环使用.溶剂自分离器底部排除.通过各项改造能实现最佳传质方式,使物料和SC-CO<,2>两相间混合的更均匀,传质更充分,萃取结晶耗时更短.3.着重研究了银杏叶内酯类化合物的超临界CO<,2>萃取结晶技术.确定夹带剂以静态加入法为佳,选择乙醇/丙酮/乙酸乙酯为2/2/6的混合溶剂为夹带剂,优化出最佳工艺条件:萃取温度60℃,萃取压力15~20MPa;分离压力10~13MPa,分离温度50~55℃;动态输入料液,CO<,2>与料液流量比1.33kg/ml.整体工艺简单,萃取所需的压力和温度要求不高,容易实现,效率高,萃取率可达69﹪,银杏内酯纯度可达60.36﹪.4、应用超临界CO<,2>萃取结晶技术脱溶处理银杏黄酮产品.动态输入料液,萃取压力25MPa,温度45℃;分离压力10MPa,温度55℃;CO<,2>流量稳定在40kg/h,料液流量1.5ml/min.能除去正丙醇等有机溶剂,使溶剂残留量达到国家药典规定标准,收集萃余物,可得富含银杏总黄酮的产品.5.通过探索最佳分析条件,建立分光光度法测定银杏黄酮类化合物的分析方法.显色剂用量:5﹪亚硝酸钠水溶液0.3ml,10﹪硝酸铝水溶液0.3ml;滴加1mol/L氢氧化钠水溶液4ml控制pH值;显色时间10min;测定波长510nm.该课题的研究是新世纪生物制药领域的一项新的尝试,克服了一般溶剂分离天然药物的不足,具有非常广阔的发展前景,必将产生巨大的经济效益和社会效益.
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