近年来,糖尿病因其高发病率一直困扰着人类的健康,临床上用药单一且副作用大,从天然产物中发现新型抗糖尿病药物——α-糖苷酶/淀粉酶抑制剂成为研究热点。桦褐孔菌在俄罗斯、中国等国被用作为民间药物治疗糖尿病、心血管疾病和癌症历史悠久。但由于其自然资源的稀缺,运用人工技术扩大培养成为新的趋势。本论文比较研究了桦褐孔菌野生菌核和液体发酵三萜类化合物对α-葡萄糖苷酶抑制和α-淀粉酶的抑制作用和组成的差异,明确了利用液体深层发酵技术培养桦褐孔菌来获得活性三萜的有效性。本研究对菌核和发酵菌丝体的三萜类化合物进行了色谱分离,对具体化合物进行分析鉴定,初步确定了有效成分。论文的主要研究成果归纳如下:1、桦褐孔菌菌核中分离得到3种四环三萜类化合物单体,经HPLC、NMR分析鉴定为羊毛甾醇、桦褐孔菌醇和栓菌酸。液体发酵菌丝体中分离得到3种三萜类化合物,经HPLC/MS分析鉴定为桦褐孔菌萜D、lawsaritol和白桦脂酸。桦褐孔菌醇对α-葡萄糖苷酶具有最强抑制活性,桦褐孔菌萜D对α-淀粉酶具有最强抑制活性,效果显著优于阿卡波糖。2、在生物活性指导下,从液体发酵菌丝体中分离得到三组活性成分。组分4、7、8和阿卡波糖抑制α-葡萄糖苷酶的IC₅₀分别为1.33、1.52、0.26和0.37 mg/m L,抑制α-淀粉酶的IC₅₀分别为7.86、15.59、8.88和10.51 mg/m L。与阳性对照相比,组分4对α-葡萄糖苷酶有显著抑制作用,组分4、8对α-淀粉酶有显著抑制作用。组分4、7和8的主要物质分别为桦褐孔菌萜D、lawsaritol和白桦脂酸。3、阳性对照阿卡波糖抑制α-葡萄糖苷酶的IC₅₀为0.37 mg/m L,作用类型为竞争性抑制,菌核中的羊毛甾醇的IC₅₀为0.60 mg/m L,桦褐孔菌醇的IC₅₀为0.15mg/m L,栓菌酸的IC₅₀为0.187 mg/m L,它们的作用类型为竞争性抑制。阿卡波糖抑制α-淀粉酶的IC₅₀为10.51 mg/m L,作用类型为非竞争性与竞争性抑制混合类型,羊毛甾醇的IC₅₀为为9.51 mg/m L,桦褐孔菌醇的IC₅₀为14.31 mg/m L,栓菌酸的IC₅₀为大于100 mg/m L,它们的作用类型为竞争性抑制。4、药用真菌与中草药双向发酵是一种新型药材开发技术。在基础发酵培养基添加杜仲壳对桦褐孔菌的生长和总三萜产量无促进作用。杜仲皮、叶的水提液的添加使得桦褐孔菌生物量显著增加了4.30%和26.82%。杜仲皮水提液的添加使得三萜总产量显著提高了14.44%;而杜仲叶水提液的添加使得三萜总产量显著下降了45.80%。总之,桦褐孔菌中的三萜类化合物可以抑制α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶的活性为桦褐孔菌开发为新型酶抑制剂提供理论依据。菌核和液体发酵的三萜组成不同,液体发酵培养产生的活性三萜桦褐孔菌萜D、lawsaritol和白桦脂酸是首次发现。此外,液体培养条件对桦褐孔菌发酵生物量和三萜积累有重要影响。