香菇作为一种药食两用真菌,其有效成分之一的香菇多糖具有多种生物活性。本文通过对香菇多糖进行膜分离、高速逆流等一系列的分离纯化研究,得到以下结果:1、利用膜分离技术对香菇粗多糖进行分级分离。首先采用10k、3.5k两种截留分子量的卷式聚醚砜膜,将香菇粗多糖分成分子量分布差异较大的三部分,同时,以高效液相为评价手段,研究了稀释次数与膜分离效果之间的关系,优选了最佳稀释次数为3次。2、采用正丁醇-乙酸乙酯-水体系为逆流溶剂体系,长链离子液体溴代1-十八烷基-3-甲基咪唑(C18mim·Br)为溶剂添加剂,以膜分离分级后的香菇多糖为原料,将高速逆流色谱技术应用于香菇多糖的分离纯化中,结果显示,长链离子液体能改善高速逆流对香菇多糖的分离效果,但离子液体的去除有待进一步研究:先后采用不同比例——5:4:10(v/v)和7:2:10(v/v)——正丁醇-乙酸乙酯-水溶剂体系对香菇多糖进行连续的逆流分离,香菇多糖达到了较大量的富集,为下一步的凝胶纯化减小了难度。3、以膜分离及高速逆流分离后的样品为原料,通过聚丙烯酰胺凝胶Sephacryl S100-300过滤精制,得到分子量均一的香菇多糖len1-2及纯度较高的香菇多糖len2-1。本研究对大量制备香菇多糖所进行的分离纯化工艺是可行、高效的,为后续的结构分析和生物活性研究打下了坚实的基础。