去卵巢骨质疏松大鼠骨髓间充质干细胞的体外成骨诱导

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背景近年来对于绝经后骨质疏松发病机制的研究不断深入,骨髓间充质干细胞逐渐成为研究热点。目的观察去卵巢骨质疏松大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)的体外成骨分化。方法将6月龄雌性SD大鼠双侧卵巢切除建立骨质疏松(OP)模型。实验分为4组:正常BMSCs组(BMSCs control组);骨质疏松BMSCs组(BMSCs ovx组);正常BMSCs成骨诱导组(OSI control组);骨质疏松BMSCs成骨诱导组(OSIovx组)。全骨髓贴壁法培养正常和骨质疏松大鼠BMSCs至第3代(P3)细胞用于实验。倒置相差显微镜观察细胞形态,流式细胞仪测定细胞周期、增殖指数(PI)。加成骨诱导液进行成骨诱导,检测各组BMSCs碱性磷酸酶活性,茜素红染色法比较各组钙结节的形成。结果(1)细胞形态:OSI control组、OSI ovx组均具有成骨细胞的形态特征,但OSI ovx组形态变化相对缓慢;(2) PI:BMSCs control组高于BMSCs ovx组(P<0.05);(3) ALP活性:OSI各组均明显高于相应BMSCs组(P<0.05); OSIcontrol组明显高于OSI ovx组(P<0.05);(4)茜素红染色:OSI各组均呈阳性,相应BMSCs组呈阴性;且OSI control组染色强于OSI ovx组。结论去卵巢骨质疏松大鼠BMSCs的增殖能力和成骨分化能力明显降低,可能与去卵巢大鼠OP的发生相关。
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