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微高压CO2(petit-high pressure carbon dioxide;p-HPCD)是一种新型的非热杀菌技术,具有价格低廉、易取得、无残留等优点。但该技术使用的CO2压力较小,需要较长的处理时间或较高的处理温度才能保证微生物安全,这会降低加工效率,影响食品品质。因此,构建基于p-HPCD的联合杀菌技术对推动其在食品工业中的应用具有重要意义。植物精油是一种天然抗菌剂,但高剂量使用会产生令人不快的气味,还可能会对肠道细胞产生负面影响。本文将p-HPCD与植物精油相结合,分别研究了联合技术对常见食源性致病菌鼠伤寒沙门氏菌(Salmonella typhimurium)和单增李斯特菌(Listeria monocytogenes)的失活效果、协同效应,及协同处理失活S.typhimurium的作用机制,同时开展了联合技术在牛乳杀菌保鲜中的应用研究。主要研究结果如下:(1)p-HPCD联合植物精油对S.typhimurium和L.monocytogenes的协同抗菌作用研究。肉桂精油(cinnamon essential oil,CEO)对S.typhimurium和L.monocytogenes具有良好的杀灭效果。与p-HPCD或CEO单独处理相比,p-HPCD联合CEO对两种致病菌的杀灭效果显著增强。在1.3 MPa、30℃下,p-HPCD联合CEO(终浓度为0.03125%)处理3 h后,S.typhimurium和L.monocytogenes分别减少了5.39和5.49 log10CFU/m L,显著高于各单独处理组(p<0.05)。协同效应评估结果显示,联合处理对两种细菌的抑制均具有协同效应,且作用于S.typhimurium时协同作用更强。(2)p-HPCD联合CEO对S.typhimurium的协同抗菌机制研究。在1.3 MPa、30℃下p-HPCD联合CEO(终浓度为0.03125%)处理3 h后,S.typhimurium的细胞形态发生明显变化,细胞膜通透性增强、膜电位下降,胞内蛋白质和ATP等物质外泄;协同处理还诱导了胞内ROS水平升高,扰乱细胞内氧化还原稳态,可能导致细胞发生氧化损伤,这可能是p-HPCD联合CEO失活S.typhimurium的主要协同作用机制。此外,p-HPCD联合CEO能够有效抑制fil C、hila、invl和ssr A等毒力基因的表达,从而可能降低S.typhimurium的致病性。(3)p-HPCD联合CEO在牛乳杀菌中的应用研究。在1.3 MPa、40℃下,p-HPCD联合CEO(终浓度为0.03125%)处理6 h后,低脂牛乳和全脂牛乳中S.typhimurium分别降低了3.18和0.78 log10CFU/m L,L.monocytogenes分别降低了1.51和0.35 log10CFU/m L,细菌减少量均显著高于各单独处理组(p<0.05)。联合处理对低脂牛乳的抗菌效果最优,且牛乳中S.typhimurium对联合处理更为敏感。在4℃下贮藏6 d后,与未处理组相比,p-HPCD联合CEO处理组低脂牛乳和全脂牛乳中的S.typhimurium分别减少4.67和1.41 log10CFU/m L,显著高于各单独处理组(p<0.05),但对全脂牛乳中L.monocytogenes的联合抑制作用并不显著。联合处理对贮藏期两种牛乳中S.typhimurium的抑制效果具有良好的协同增效效应,而仅对低脂牛乳中L.monocytogenes表现出了协同作用。