目的:本研究利用不同条件培养大熊猫源石膏样小孢子菌,毛发穿孔试验及药敏试验探究该菌的部分生物学特性。对大熊猫源石膏样小孢子菌胞外蛋白酶提取、鉴定及致病性研究,以探究其致病因子,为进一步研究该菌致病机制及诊断、治疗提供参考。方法:采用不同条件(培养基、碳源、氮源、温度、PH)培养大熊猫源石膏样小孢子菌,每天观察其生长形态并用十字交叉法测量其生长速度。通过毛发穿孔试验利用显微镜和扫描电镜在不同培养时间观察该菌对毛发的损伤程度。通过96孔板微量稀释抗真菌药敏试验测定5种药物对该菌的最小抑菌浓度(MIC)。通过毛发诱导其液体发酵,提取胞外产生的胞外蛋白酶。利用高压液相色谱-质谱联用对粗提到的蛋白酶进行鉴定,将数据通过GO功能及富集分析、KEGG Pathway分析和蛋白互作(PPI)分析等生物信息学分析。结果:1.本研究条件下大熊猫源石膏样小孢子菌的最适培养条件是25℃,pH 10,M-SDA,最适碳源和氮源分别为葡萄糖和蛋白胨。2.毛发穿孔试验培养7d,菌丝密集,孢子分节,头发的损伤程度严重甚至穿孔。3.氟康唑MIC值为32μg/mL;酮康唑和环吡酮胺MIC值为1μg/mL;伊曲康唑MIC值为0.5μg/mL;灰黄霉素MIC值为2μg/mL,大熊猫源石膏样小孢子菌敏感药物依次为:伊曲康唑>酮康唑=环吡酮胺>灰黄霉素>氟康唑。4.提取到了一些与皮肤癣菌相关的胞外蛋白酶,即β亚硫酸盐还原酶、丝氨酸蛋白酶、氨肽酶、二肽酶等。这些蛋白酶可引起小鼠皮肤表皮层的角质层和棘细胞脱落,真皮层内毛囊、汗腺数量明显减少或消失,炎性细胞广泛浸润等。结论:1.大熊猫源石膏样小孢子菌在广泛的培养条件下可生长;该菌与头发培养7d后可导致头发穿孔;敏感药物依次为:伊曲康唑>酮康唑=环吡酮胺>灰黄霉素>氟康唑。2.该菌能分泌与皮肤癣菌相关的分泌蛋白酶,即β亚硫酸盐还原酶、丝氨酸蛋白酶、氨肽酶、二肽酶等。提取到的胞外蛋白酶粗酶液具有破坏小鼠角质层,引起炎症等作用。