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目的利用线栓法制作SD大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型。探讨远端肢体缺血后处理是否对大鼠局灶性脑缺血及再灌注损伤具有保护作用并分析其可能的保护机制。初步探讨远端肢体缺血后处理的可靠作用时间窗。方法75只健康雄性SD大鼠,随机分成3组:假手术组(Sham组,n=15)、缺血再灌注组(I/R组,n=15)、远端肢体缺血后处理(RIPost C组,n=45),RIPost C组按后处理时机不同分为RIPost C 0h、RIPost C 2h、RIPost C 4h三个亚组。常规麻醉各组大鼠,仰卧位固定、消毒。Sham组:取颈部正中切口,钝性分离右侧胸锁乳突肌及颈前肌群,暴露右侧颈总动脉(Common carotid artery,CCA)、颈内动脉(Internal carotid artery,ICA)、颈外动脉(External carotid artery,ECA),仅做分离颈部血管操作,不行线栓插入及缺血后处理,随后逐层缝合肌肉及皮肤组织。I/R组:除行上诉操作外,结扎ECA远心端,微型动脉夹夹闭CCA及ICA近心端,于ECA近心端剪一小口,顺利插入线栓,成功阻断右侧大脑中动脉血流后固定线栓,缝合皮肤,于闭塞90分钟后拔出线栓,恢复血流灌注。RIPost C组:各亚组与I/R组手术操作相同,分别在拔出线栓后0h、2h、4h对双下肢连续进行4组缺血后处理,具体处理方式为橡皮筋置于双下肢根部紧固5min/松绑5min,循环4次。脑缺血再灌注24小时,参照Zea-Longa的神经功能评分方法进行神经行为缺损评分;干湿重比值法测定脑组织含水量百分比;TTC染色法测定脑梗死体积并计算梗死体积百分比;TUNEL法评估缺血半暗带细胞凋亡;免疫组化测定缺血半暗带Bcl-2、Bax蛋白阳性细胞表达数。结果1神经功能评分:Sham组大鼠均未出现神经功能缺损表现;I/R组及RIPost C组大鼠均出现不同程度的肢体瘫痪,评分较Sham组升高,差异具有统计学意义(P<0.05);RIPost C组较I/R组评分降低,差异具有统计学意义(P<0.05);随后处理时间推迟,RIPost C各亚组评分呈升高趋势,但差异无统计学意义。2脑组织含水量:I/R组及RIPost C组脑组织含水量较Sham组升高,差异具有统计学意义(P<0.05);RIPost C组较I/R组降低,差异有统计学意义(P<0.05);随后处理时间推迟,RIPost C各亚组脑组织含水量呈升高趋势,但各亚组间差异无统计学意义。3脑梗死体积测定:Sham组脑组织染色成红色,未见白色梗死灶;RIPost C组及I/R组均可见明显梗死灶;随后处理时间推迟,RIPost C组脑梗死体积呈扩大趋势,RIPost C 4h组较RIPost C0h组及RIPost C 2h组脑梗死体积扩大且差异具有统计学意义(P<0.05)。4细胞凋亡:Sham组大鼠未见明显凋亡细胞,I/R组及RIPost C组凋亡细胞数较Sham组明显增多,差异具有统计学意义(P<0.05);随后处理时间推迟,RIPost C各亚组凋亡细胞数逐渐增多,但均较I/R组减少,差异具有统计学意义(P<0.05)。RIPost C 2h组较RIPost C 0h组凋亡细胞数增多,但差异无统计学意义。RIPost C 4h组较RIPost C 0h组、RIPost C 2h组凋亡细胞数增多且差异具有统计学意义(P<0.05)。5 Bcl-2及Bax蛋白阳性细胞表达:Sham组仅有少量Bcl-2及Bax蛋白阳性细胞表达。与Sham组相比,I/R组及RIPost C组Bcl-2、Bax蛋白阳性细胞表达数明显增多,差异具有统计学意义(P<0.05);与I/R组相比,RIPost C组Bcl-2蛋白阳性细胞表达数升高,Bax蛋白阳性细胞表达数降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。随后处理时间推迟,RIPost C组Bcl-2蛋白阳性细胞表达数呈下降趋势,Bax蛋白阳性细胞表达数呈上升趋势,RIPost C 2h组较RIPost C 0h组差异无统计学意义。相反,RIPost C 4h组较RIPost C 0h差异具有统计学意义(P<0.05)。在Bcl-2/Bax比值比较中,与Sham组相比,I/R组Bcl-2/Bax比值降低,差异具有统计学意义(P<0.05),RIPost C组Bcl-2/Bax比值升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。随后处理时间推迟,RIPost C组Bcl-2/Bax比值呈下降趋势,RIPost C 2h组较RIPost C 0h组差异无统计学意义。但RIPost C4h组较RIPost C 0h组差异具有统计学意义(P<0.05)。结论1远端肢体缺血后处理对大鼠局灶性脑缺血及再灌注损伤具有保护作用;2其机制之一为调控Bcl-2、Bax蛋白不同程度表达,从而减轻神经细胞凋亡对神经元的损伤;3随后处理时间推迟,远端肢体缺血后处理的脑保护作用呈下降趋势,较可靠的后处理时间窗为再灌注即刻至之后2小时。