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肺动脉高压（Pulmonary hypertension,PH）是一种有极高致死率的严重疾病,几乎所有类型都存在肺血管内皮依赖性舒张受损和收缩高反应性。5-羟色胺（Serotonin hydrochloride,5-HT）是一种强效的肺血管收缩剂,在PH患者血浆中水平升高。在PH动物模型中,也证实慢性低氧能够增强5-HT引起的肺血管收缩反应。已有研究表明,5-HT的产生可激活相应受体,从而引起烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（Nicotinamide adenine dinucleotide phosphate,NADPH）氧化酶的活化,进而产生过氧化氢（Hydrogen peroxide,H2O2）,引起体循环动脉和血管平滑肌的收缩增强。瞬时受体电位M2（Transient receptor potential melastatin 2,TRPM2）是一种氧化还原敏感的阳离子通道,受多种因素的调节,包括胞浆游离Ca2+浓度(Intracellular free calcium concentration,[Ca2+]i)、二磷酸腺苷核糖（Adenosine diphosphate ribose,ADPR）和H2O2的协同促进作用。H2O2和氧化应激可通过促进细胞核中聚ADPR聚合酶（Poly ADPR polymerases,PARPs）形成和线粒体中烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（Nicotinamide adenine dinucleotide,NAD）酶的活性来间接激活TRPM2。抗氧化剂或针对活性氧（Reactive oxygen species,ROS）特定来源的药物,已被认为是PH的潜在治疗方法。实验室早期研究中,发现PH过程中,大鼠肺动脉对5-HT表现出了明显增强的剂量依赖性收缩,NADPH氧化酶（NADPH oxidase,NOX）抑制剂可减弱该过程。此外,肺动脉主干（Pulmonary arteries,PAs）与肺动脉分支（Small pulmonary arteries,sPAs）在PH早期表现明显不同,肺动脉主干在早期并无明显病理变化,而肺动脉分支则更早表现出严重的肌化现象。在功能上,肺动脉主干与肺动脉分支也表现出了明显差异,如对多种血管活性物质表现出不同的血管反应性,增殖能力存在显著差异等。本研究通过建立慢性低氧肺动脉高压（Chronic hypoxia pulmonary hypertension,CHPH）模型,运用不同NOX抑制剂和TRPM2抑制剂预处理sPAs,观察5-HT诱导的剂量依赖性收缩的变化,研究NOXs-TRPM2在5-HT引起的CHPH大鼠sPAs收缩反应中的作用,并探讨该过程中主要参与的NOX亚型,以及可能参与5-HT诱导的血管收缩的信号通路。目的:观察慢性低氧诱导的PH模型大鼠上,NOXs-TRPM2抑制剂对5-HT引起的sPAs收缩的影响,探讨NOXs-TRPM2通路在5-HT引起的CHPH大鼠sPAs收缩反应中的作用。方法:（1）通过血流动力学检测大鼠右心室收缩压（Right ventricle systolic pressure,RVSP）、右心室质量指数（Right ventricular mass index,RVMI）来评价慢性低氧诱导的PH模型是否制备成功;（2）采用微血管张力检测技术检测血管张力,观察5-HT引起的大鼠sPAs收缩效应;（3）采用激光共聚焦张力检测系统同步记录sPAs血管张力和平滑肌细胞内Ca2+信号的变化。结果:（1）经慢性低氧诱导三周后,大鼠RVSP和RVMI均显著升高,提示肺动脉高压模型制备成功。（2）KCl引起的大鼠sPAs收缩反应性显著高于PAs,但在正常大鼠与CHPH大鼠间无显著性差异。（3）NOX1/2/4抑制剂ML171、gp91 ds-tat、GKT分别预处理正常大鼠sPAs,与对照组相比,KCl引起的血管收缩反应无显著性差异。（4）TRPM2抑制剂ACA、2-APB预处理正常大鼠sPAs剂量依赖性地抑制KCl诱导的血管收缩反应,提示后续应选用合适剂量,保证其对sPAs的抑制作用均为特异性抑制。（5）5-HT诱导的收缩反应在正常大鼠sPAs上几乎无作用,而在CHPH大鼠中显著增强。（6）NOXs在5-HT引起的sPAs收缩反应中的作用:a.ML171、gp91 ds-tat、GKT预处理抑制5-HT引起的正常大鼠sPAs收缩反应,三者间无显著性差异。b.ML171、gp91 ds-tat、GKT预处理抑制5-HT引起的CHPH大鼠sPAs收缩反应,其抑制幅度ML171/GKT>gp91 ds-tat。c.ML171、GKT预处理抑制5-HT引起的CHPH大鼠sPAs收缩和平滑肌细胞内Ca2+信号增加幅度（△F/F0）,其抑制幅度ML171>GKT。（7）TRPM2在5-HT引起的sPAs收缩反应中的作用:a.ACA、2-APB预处理抑制5-HT引起的正常大鼠sPAs收缩反应,其抑制幅度ACA>2-APB。b.ACA、2-APB预处理抑制5-HT引起的CHPH大鼠sPAs收缩反应,其抑制幅度ACA>2-APB。c.ACA预处理抑制5-HT引起的CHPH大鼠sPAs收缩和平滑肌细胞内Ca2+信号增加幅度（△F/F0）。结论:（1）CHPH大鼠sPAs中5-HT诱导的剂量依赖性收缩反应相较于正常大鼠显著增强。（2）NOX1/4-TRPM2参与介导CHPH大鼠sPAs中5-HT诱导的收缩高反应性及血管平滑肌细胞[Ca2+]i变化,其中NOX1相较于其他亚型在该效应中起更重要作用。