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实验目的：h-PNAS-4是近来发现的新基因，初步的研究表明，它是一凋亡相关基因。本实验旨在研究新基因h-PNAS-4对人卵巢癌细胞系：顺铂耐药细胞株A2780／DDP、敏感株A2780和细胞株skov-3的体外增殖的抑制作用，及诱导凋亡的作用；同时观察h-PNAS-4联合热处理时对上述细胞系体外增殖的影响。实验方法：用脂质体(Lipofectamine2000)转染的方法将h-PNAS-4分别导入细胞株A2780／DDP、A2780和skov-3，同时导入带有表达绿色荧光蛋白(GFP)的h-PNAS-4，通过荧光计数确定转染效率；利用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT法)检测转染后48小时h-PNAS-4对人卵巢癌细胞系体外增殖的抑制作用；琼脂糖凝胶电泳(DNA LADDER)及HOECHST染色检测其诱导凋亡的作用；转染后24小时，将各细胞系进行热处理(43℃，2h)，再于培养箱中培养22小时，采用Weeb系数判定h-PNAS-4联合热处理对上诉细胞系体外增殖的作用。实验结果：1．脂质体Lipofectamine2000能成功的将新基因h-PNAS-4导入人卵巢癌细胞系。2．h-PNAS-4能明显的抑制人卵巢癌细胞增殖：在细胞系A2780／DDP、A2780中其抑制率分别为48.32％、60.48％，与各对照组相比，其P＜0.05。3．h-PNAS-4能显著的诱导人卵巢癌细胞的凋亡：琼脂糖凝胶电泳(DNA LADDER)显示DNA呈现阶梯状条带；HOECHST染色表现出核浓缩、分裂及深染。4．h-PNAS-4联合热处理时，采用Weeb系数显示：在细胞株A2780／DDP中二者表现为次相加作用，在细胞A2780中二者则无此作用。实验结论：脂质体Lipofectamine2000能成功的将新基因h-PNAS-4导入人卵巢癌细胞；h-PNAS-4有明显的抑制人卵巢癌细胞的增殖，诱导其凋亡作用；h-PNAS-4联合热处理时，在细胞A2780／DDP中二者显示出相加作用，在细胞A2780中则无此作用。