【摘 要】
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哺乳动物CTHRC1(collagen triple helix corltainingl)基因是2005年发现的一个新基因,最先是在对正常大鼠动脉和球状损伤动脉的差异表达序列筛选中发现的。它瞬时表达于损伤血
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哺乳动物CTHRC1(collagen triple helix corltainingl)基因是2005年发现的一个新基因,最先是在对正常大鼠动脉和球状损伤动脉的差异表达序列筛选中发现的。它瞬时表达于损伤血管部位,通过抑制胶原基质的沉积和促进细胞迁移参与了血管的损伤修复过程。
在PAC1和MEF细胞中过表达CTHRC1以后能够显著提高细胞的迁移能力。同时最近的研究报导显示CTHRC1的异常高表达广泛存在于人类多种实体癌中,可能与癌组织的侵袭和恶性化相关。为了探讨CTHRC1在肝癌的发生发展中是否起到一定的作用,我们进行了初步的研究工作。
我们运用Northern blot的方法分析了16种人类正常组织中和11种人类肿瘤细胞株中CTHRC1基因mRNA的表达水平,发现CTHRC1在多种人类正常组织中都有表达,而在正常肝脏组织中几乎没有表达。而在所检测的11种人类肿瘤细胞株中,只在Hela和K562这两种细胞株中检测到CTHRC1的表达,在其余细胞株中都没有检测到表达。
随后我们运用Northern blot和real-time PCR的方法分析了14例肝癌患者中癌和癌旁肝组织CTHRC1基因mRNA的表达水平,结果显示在其中11对样品中CTHRC1基因在癌组织中的表达高于癌旁组织(P<0.01),而在其余3对中没有统计学差别。
同时我们运用RT-PCR和rea1-time PCR的方法分析了8种肝癌细胞株中CTHRC1基因mRNA的表达水平,结果显示CTHRC1在HepG2、Hep3B、MHCC97-L、HCCLM3、HuH7这5种肝癌细胞株中有较高的表达水平,而在BEK-1402、SMMOL/LC-7721、SMMC-7701中的表达水平很低。
为了探讨CTHRC1基因表达水平的差异在肝癌的发生发展过程中所起的作用,我们通过体外侵袭和迁移实验,对CTHRC1基因过表达以后MHCC97-L肝癌细胞株的浸润和转移能力进行了分析。研究结果表明,CTHRC1基因的过表达能够促进肝癌细胞的浸润和运动能力。以上结果为我们下一步深入研究其在肝癌的发生、发展和侵袭转移中所起的作用打下了良好的基础。
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