论文部分内容阅读
灰葡萄孢霉侵染果蔬使其患灰霉病,导致果蔬在贮藏期间大批量腐烂变质,造成严重的经济损失。目前,主要用化学杀菌法对果蔬采后病害进行防治,但长期使用化学杀菌剂存在病原菌产生抗性、农药残留等弊端。生物防治具有成本低、安全、无污染等优点,是果蔬采后病害防治领域的研究热点,而且已证实拮抗菌对引起果蔬病害的病原菌有显著的抑制效果。近年来生物防治的研究停滞在防治方法方面,对于病原菌的抑制机理和拮抗菌的实际应用尚未有深入研究。本文选用酵母菌、银杏内生菌,研究其对灰葡萄孢霉的抑菌机制、黄瓜机械损伤后抗病性及黄瓜在贮藏期间品质变化的影响,以期为引起果蔬采后病害的灰葡萄孢霉进行生物防治奠定理论基础。结果如下:1采用生长速率法,从9株银杏内生细菌、7株酵母菌中筛选出对灰葡萄孢霉抑制作用最强的菌株为内生菌R1、有孢汉逊酵母菌,抑制率分别为83.33%,89.87%,选择其为目标菌株。对目标菌株R1 16S rRNA鉴定,结果表明R1是贪噬菌属,命名为Variovorax sp.R1。2平板抑制试验,考察目标菌株对灰葡萄孢霉的抑制作用。当Variovorax sp.R1浓度为10~9 CFU/mL时,对灰葡萄孢霉的抑制率为84.93%;当有孢汉逊酵母菌浓度为10~9CFU/mL时,对灰葡萄孢霉的抑制率最高,为93.37%,其抑制率都随着菌体浓度的增加而增加。3有孢汉逊酵母菌、Variovorax sp.R1对灰葡萄孢霉的抑制机理包括:(1)有孢汉逊酵母菌、Variovorax sp.R1、嘧霉胺可破坏灰葡萄孢霉细胞膜,使培养液电导率升高,灰葡萄孢霉细胞膜通透性变大,胞内电解质外渗,菌体蛋白含量减少。(2)有孢汉逊酵母菌、Variovorax sp.R1、嘧霉胺降低灰葡萄孢霉PPO、POD酶活性,对SOD酶活力的影响相对较小,使抗性酶对灰葡萄孢霉的保护作用减弱,呈现其对灰葡萄孢霉的抑制作用。4有孢汉逊酵母菌、Variovorax sp.R1对黄瓜采后病害抗性诱导机制研究结果如下:(1)有孢汉逊酵母菌、Variovorax sp.R1处理可显著增加黄瓜PPO活性、POD活性、CAT活性、β-1,3-葡聚糖酶、总酚含量、木质素含量,总RNA含量,抑制MDA含量的积累,增强黄瓜抗病性,保护黄瓜不受病原菌迫害。(2)嘧霉胺处理组黄瓜总酚、总RNA含量增加,表明嘧霉胺能够抑制灰葡萄孢霉,保持黄瓜贮藏期品质。5有孢汉逊酵母菌、Variovorax sp.R1、嘧霉胺可通过调节黄瓜抗性酶、抑制病原菌,延缓黄瓜重量、硬度、褐变度、可滴定酸、Vc等品质变化。上述结果表明,有孢汉逊酵母菌、Variovorax sp.R1、嘧霉胺对灰葡萄孢霉均有抑制作用。黄瓜机械损伤后,经有孢汉逊酵母菌、Variovorax sp.R1、嘧霉胺处理,均在不同程度上诱导了黄瓜的抗病性,减少黄瓜贮藏期间营养成分的流失,基于此研究可以为果蔬采后病害防治提供理论依据。