神经趋向性是指神经在生长发育和再生过程中,新生的轴索受到来自外周组织释放的某些化学物质引导而发生的定向生长。研究表明,神经趋向性再生可分为组织特异性、解剖特异性和终末器官特异性。目前,对于解剖特异性仍然存在争议,其基础和机制研究还不清楚。面神经是颌面部重要的神经,面神经损伤后的趋向性生长,尚未见相关报道。根据趋向性再生理论,很多学者尝试用管状支架材料修复单支面神经缺损,多分支导管尚未见报道。可用做导管的材料有很多,壳聚糖因其良好的生物相容性及可降解的特点,越来越受到重视,目前,尚未见用壳聚糖制作多分支导管的报道。本研究从面神经解剖特异性神经趋向性再生的相关基础研究入手,为下一步的研究奠定基础。第一部分：兔、猪、狗、猴面神经颅外段的解剖比较目的：比较兔、猪、狗、猴的面神经颅外段的解剖。材料和方法：全麻下解剖新西兰兔、小型猪、Beagle犬、猴的面神经,记录面神经分支的走行、分支数,测量面神经各支直径、长度,取材面神经主干及各分支标本,记录轴突数、测算轴突密度及髓鞘厚度。结果：四种动物的分支数不全相同,走行各有差异,猴的面神经走行与人类最为接近,但变异最大。在面神经出茎乳孔2cm范围内,四种动物走行比较稳定。猪的面神经干最粗,Beagle犬面神经干的轴突数最多。四种动物的面神经干长度近似,直径差异较大,组织学表现较为一致。结论：兔、猪、狗和猴的面神经出茎乳孔后2cm范围内,面神经走行和分支数目在同一种属间相对稳定,猴与人类最为接近,兔、猪、狗与人类有所不同。四种动物的面神经干长度近似,直径差异较大,组织学表现相似,轴突数不随直径的变化而变化。第二部分：多分支壳聚糖导管的构建目的：以壳聚糖为材料构建多分支导管。材料和方法：用粘接法和模具成型法制作多分支壳聚糖导管,优化设计并制作多分支壳聚糖导管模具,摸索导管的制作工艺。结果：2种方法都能制成多分支壳聚糖导管。所设计的模具可以成功制作出多分支壳聚糖导管,并能根据实验需要改变分支数目、调整分支导管的直径和分支间的夹角。成功掌握了模具成型发制备壳聚糖管的工艺。结论：模具成型法制作的多分支壳聚糖导管明显好于粘接法。第三部分：兔面神经解剖特异性趋向性再生模型的建立目的：摸索建立面神经解剖特异性趋向性再生的动物模型的方法。材料和方法：新西兰兔6只,手术造成面神经干和所有分支5mm缺损动物模型,用多分支壳聚糖导管修复,术后1、2、3、8、16、24周观察面部行为学。结果：动物模型建立成功。5只动物存活至术后24周,术区未出现肿胀、破溃、排异等现象。结论：成功建立面神经解剖特异性趋向性再生的动物模型。第四部分：神经示踪法研究面神经主干中的分支分布情况实验一、荧光金示踪法探索大鼠面神经主干中的分支分布情况目的：了解大鼠面神经各分支在神经干颅外段的空间分布情况。材料和方法：15只大鼠随机分为5组,用荧光金作示踪剂,每组标记一个神经分支。2天后取材,在面神经干分叉处、中点、茎乳孔连续冰冻切片,荧光镜下观察。结果：在大鼠面神经分叉处,颞支的神经纤维均匀分布在内上方,面积占整个象限的1/3左右；颧支的神经纤维分布在外上1/4；颊支的神经纤维均匀布满神经干的上半部；下颌缘支的神经纤维均匀分布在神经干的下半部,面积略小于颊支；颈支的神经纤维均匀分布在外上方,大约占外上象限的1/4；在大鼠面神经干的中点,颞支的神经纤维均匀分布在内上方,面积占整个象限的1/2左右；颧支的神经纤维分布在外上1/2；颊支的神经纤维均匀布满神经干的上半部；下颌缘支的神经纤维均匀分布在神经干的下半部；颈支的神经纤维均匀分布在外上方,上密下疏,大约占外上象限的1/2；在大鼠面神经干出茎乳孔处,颞支神经纤维向圆心蔓延,接近椭圆形,占据了整个神经干的内上1/3面积；颧支神经纤维仍向中心蔓延,弥散分布在外上部；颊支神经纤维仍向下蔓延,标记面积约占整个干的2/3；下颌缘支神经纤维仍向上蔓延,标记面积约占整个干的2/3,标记区域神经纤维密度不均；颈支神经纤维向中心扩散,在整个神经干的中心1/2呈椭圆形。结论：大鼠面神经分叉处各分支分布区域明显局限于某一范围,各分支的分布区域略有重叠,组合后布满整个神经横断面；随着向茎乳孔靠近,分布区域逐渐扩大,重叠面积扩大；到茎乳孔时各分支都有纤维分布在干的中心1/2,界线消失,无法分辨。实验二、双重示踪法探索大鼠面神经主干中的分支分布情况目的：了解大鼠面神经茎乳孔附近颊支和下颌缘支的神经纤维的交叉分布情况。材料和方法：用示踪剂荧光金标记大鼠的颊支,同时用荧光红标记大鼠的下颌缘支。一周后取材,在面神经干茎乳孔处和脑干冰冻切片,荧光镜下观察。结果：在大鼠面神经干出茎乳孔处,颊支和下颌缘支的神经纤维分别弥散分布在横断面的上、下方,重叠面积达到整个神经断面的2/3,没有明显的界线,也没有双重标记的神经纤维。脑干冠状面切片证实没有双标的神经元。结论：面神经各分支在面神经干中的分布情况,并非成束状平行前进,在茎乳孔附近,各分支的神经纤维互相缠绕,绞索状前行。