补充硝酸盐对急性运动大鼠心肌肌质网钙离子通道蛋白的影响

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目的:该实验旨在观察补充不同剂量外源性无机硝酸盐对一次性力竭运动造成的大鼠心肌肌质网钙离子通道蛋白的改善作用。通过葡萄糖调节蛋白78(glucose regulated protein 78,GRP78)蛋白表达判断肌质网应激状态,心肌肌/内质网钙-ATP酶2(sarcoplasmic/endoplasmic reticulum calcium ATPase 2,SERCA2)、受磷蛋白(phospholamban,PLN)、兰尼碱受体2(ryanodine receptors2,RyR2)蛋白表达分析外源性无机硝酸盐对心肌肌质网钙离子通道蛋白稳定表达的作用。方法:SD雄性大鼠40只随机分为5组,安静组(CP组)、运动组(EP组)、运动低剂量组(ELN组)、运动中剂量组(EMN组)、运动高剂量组(EHN组),每组各八只。适应性饲养3日后,ELN、EMN和EHN组分别按照0.3、0.7和1.0 mmol/kgBW/D剂量灌胃硝酸钠溶液,CP和EP组每日灌胃等体积生理盐水,共灌胃6日。在6日灌胃结束后,运动组和运动营养组进行一次性力竭跑台训练。力竭后即刻麻醉处死五组大鼠,取材并测定血清及心肌组织中指标变化。统计学分析采用独立样本T检验和单因素方差分析。结果:(1)EP组GRP78蛋白表达高于CP组(P<0.01)。与CP组相比,EP组SERCA2、PLN蛋白表达降低(P<0.01)。(2)血清中[NO2-]浓度,ELN组高于EP组(P<0.05),EMN组高于EP组(P<0.01)且高于ELN组(P<0.05),EHN组高于EP、ELN、EMN组(P<0.01)。血清NO浓度,ELN组高于EP组(P<0.01),EMN组高于EP、ELN组(P<0.01),EHN组高于EP、ELN组(P<0.01)。心肌NO浓度和NOS活性,CP组与EP组无显著性差异,ELN/EMN/EHN组对比EP组心肌NO含量均有提高且差异具有统计学意义,各组NOS活性差异不具统计学意义。(3)GRP78蛋白表达,ELN组低于EP组(P<0.01),EMN组低于EP组(P<0.01)且低于ELN组(P<0.05),EHN组低于EP组(P<0.01)。SERCA2蛋白ELN组表达高于EP组(P<0.01)且高于EMN、EHN组(P<0.05),EHN组表达高于EP组(P<0.05)。RyR2、PLN蛋白,EP、ELN、EMN和EHN各组间差异均不具有统计学意义。结论:(1)在NOS酶活性不改变的情况下,六日无机硝酸盐补充改善了心肌SERCA2蛋白表达,但对PLN、RyR2蛋白无显著影响。(2)六日无机硝酸盐补充能够缓解因一次性大强度运动诱导的心肌肌质网应激。相对高、低浓度硝酸盐补充手段,中剂量浓度补充对由一次性力竭运动引起的大鼠心肌肌质网应激改善效果最佳。
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