黑龙江亚洲玉米螟种群分布及GSTs家族基因功能研究

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玉米是黑龙江最主要粮食作物之一,随着育种技术发展、经济价值提高和耕作技术推广在黑龙江种植面积逐年增加,现在已经扩展到第四、第五积温带种植。玉米螟是玉米上重要的害虫,严重危害着玉米生产的产量和品质。随着耕作技术的改进以及杂交玉米的推广使玉米的种植范围扩展到不同积温带,玉米螟的危害范围也随之发生变化,而且不同积温带的种群对不同玉米品种都表现很强适应性。为明确黑龙江省玉米螟危害地理分布特点和对有毒化合物的适应机制,本研究采用ISSR分子标记方法完成了黑龙江省不同地理种群玉米螟多样性分析,种群遗传距离结果表明黑龙江省玉米螟已经在很大程度上发生了相互的迁移变化,不同种群间存在着大量的个体迁移,基因交流频繁,亲缘关系较近。基于RNA-Seq技术分别对高效氯氰菊酯处理组(GL)、丁硫克百威处理组(DL)、丁布处理组(DB)和对照组(CK)进行测序,分别得到大量原始序列,Q20高达96%以上,产量和质量满足后续分析要求。GL组有3110个差异基因,其中1546个上调,1564个下调;DL组有5196个差异基因,其中3580个上调,1616个下调;DB组有4076个差异基因,2072个上调,2004个下调,分别对应到GO功能的生物过程、细胞组分和分子功能3个主体中;KEEG通路也分别注释到内质网蛋白加工途径和核糖体等通路中;IPR富集分析得到各处理组差异表达基因主要富集到了NAD(P)绑定域和丝氨酸蛋白酶胰等蛋白功能中。我们还通过对不同处理组差异基因筛选得到了20个GST相关基因。通过生物信息学方法将NCBI数据库中所有昆虫GST基因序列、亚洲玉米螟基因组DNA、亚洲玉米螟转录组数据以及本实验中得到的GST相关基因进行比对,得到了31个得到注释的OfGST基因序列,16个OfGST全长基因序列进行序列分析,构建系统进化树及蛋白理化性质、结构分析。成功克隆出Ofgst6、Ofgst7和Ofgst15基因,并采用RT-qPCR进行表达量验证,为进一步揭示亚洲玉米螟抗性机制及黑龙江省玉米螟防控提供技术支持。
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