论文部分内容阅读
目的:强迫症(Obsessive Compulsive Disorder,OCD)是以强迫症状为主要临床相的精神疾病,强迫症是继恐怖症、物质滥用和重症抑郁之后的第四大精神科常见疾病。流行病学调查显示,强迫症在不同种族的人群中的患病率约为1.1%-3.3%。强迫症的特征为存在强迫思维和/或强迫行为。强迫思维为重复的、持续的、闯入性的、自己不想要的思维、欲望、图像;强迫行为是指感到被强迫思维所驱使着进行的精神活动或者按照必须遵守的刻板的规则进行的重复的行为。精神障碍诊断和统计手册第五版(DSM-V)把强迫及相关障碍作为独立于焦虑症之外的疾病类型,并作为一个独立的章节。近年来,越来越多的研究发现谷氨酸系统可能和强迫症发病有关,强迫症患者的大脑皮质-纹状体-丘脑-皮质区域及海马区域的谷氨酸系统功能出现紊乱,主要是谷氨酸浓度增高。拉莫三嗪是一种抗惊厥药,可稳定突触前神经元膜,通过抑制轴突电压门控的钠和钙通道减少谷氨酸的过度释放,减少以上脑区的谷氨酸浓度,进而可以缓解强迫症状。D-环丝氨酸(D-cycloserine,DCS)是N-甲基-D-天冬氨酸(N-methyl-D-aspartate,NMDA)受体的部分激动剂,可以稳定突触间隙谷氨酸浓度,可以增效暴露疗法并改善OCD症状。在本课题中,首先测试对于SSRIs治疗无反应或未完全反应的难治性强迫症患者,拉莫三嗪联合SSRIs是否比安慰剂联合SSRIs对临床症状和认知功能更有效。然后,我们拟构建大鼠强迫症模型,通过使用NMDA受体及亚单位选择性的拮抗剂,观察模型大鼠行为学生物学指标的变化,探索NMDA受体亚型各自的功能及其在海马体的作用,阐明其在强迫症的发病过程中的作用和机制;并通过神经生理学、神经行为学、生物化学、分子生物学和病理组织学等技术手段,探索该模型NMDA受体及亚单位在海马体的分布、表达情况,分析受体的激活情况同时也为强迫症的治疗提供了新的靶点。最后研究使用不同剂量的DCS对强迫症的症状及相应的生物学指标的影响,探索强迫症的新的治疗药物及药理学机制。在本研究中,我们探讨了谷氨酸相关药物对喹吡罗(QNP)诱导的强迫行为模型大鼠的强迫行为的影响及其潜在的机制,以加深我们对强迫症与谷氨酸之间联系的了解。研究方法:1、我们选择了2016年7月-2018年4月在中国医科大学盛京医院治疗的经过SSRIs药物充分治疗后仍表现出持续性强迫症的门诊患者为研究对象。符合纳入标准且不符合排除标准共51例。这些患者被随机地分为实验组和对照组,实验组患者在原SSRIs治疗基础上给予拉莫三嗪药物增强治疗8周,治疗1周后,根据患者病情及体征变化情况调整剂量。对照组在原SSRIs治疗基础上给予安慰剂治疗。本研究通过中国医科大学伦理委员会审查,所有的研究对象均签署了知情同意书。于治疗前和治疗第2、4、8周采用Y-BOCS以及HAMA评定强迫症患者强迫症及焦虑症状严重程度并比较两组患者的疗效。2、本研究构建了QNP诱导的强迫行为大鼠模型。为了检测NMDAR相关药物NVP-AAMO77,Ro25-6981和DCS对强迫症大鼠行为的影响,我们进行了一系列的焦虑及强迫性行为检测包括高架O迷宫实验,旷场实验以及石珠埋藏实验。同时,我们比较了三种药物对强迫症大鼠的焦虑和强迫行为的治疗效果。3、我们检测并比较了三种NMDAR相关药物对强迫症大鼠海马神经递质(包括谷氨酸,甘氨酸以及丝氨酸)水平的影响。为了进一步阐明NVP-AAMO77,Ro25-6981和DCS参与QNP诱导的强迫症的分子效应,我们通过免疫组化和western blot评估并比较了大鼠海马中NMDAR 2A和NMDAR 2B的表达水平。结果:1、在对照组中,男性10例,女性15例;年龄平均(35.32±2.46)岁。实验组组男性11例,女性15例;年龄平均(34.04±21.87)岁。两组患者之间治疗前的Ycale-Brown评分和HAMA评分无显著差异(P>0.05)。两组患者治疗前后的Ycale-Brown评分和HAMA评分有显著差异(P<0.05)。此外,两组患者之间治疗后Ycale-Brown评分和HAMA评分有显著差异(P<0.05),表明拉莫三嗪增强治疗SSRIs难治性强迫症方面效果显著。2、竞争性N-甲基-D-天冬氨酸谷氨酸受体(NMDAR)拮抗剂NVP-AAMO77(5 mg/kg)和Ro25-6981(5 mg/kg)显著抑制大鼠的焦虑样和强迫行为,并且所有剂量的DCS都显示出对焦虑样和大理石掩埋行为的显著抑制。3、与盐水干预组相比,NVP-AAMO77和D-环丝氨酸处理组大鼠海马中的谷氨酸(Glu)水平反映了谷氨酸能神经传递的变化,其水平明显降低。其他氨基酸的水平不受影响。此外,NVP-AAMO77显著降低了NMDAR的NR2A亚基的表达,Ro25-6981抑制了NMDAR的NR2B亚基的水平,而DCS降低了NMDAR的NR2A和NR2B亚基水平。结论:1、通过比较两组患者的治疗效果,即实验组患者给予拉莫三嗪增强治疗8周的疗效,对照组给予安慰剂。我们发现,拉莫三嗪增强疗法在治疗SSRIs难治性强迫症方面效果显著。2、通过一系列的行为检测,我们的结果显示NMDAR相关药物NVP-AAMO77,Ro25-6981和DCS能够抑制强迫行为模型大鼠的焦虑和强迫行为。3、NMDAR相关药物NVP-AAMO77,Ro25-6981和DCS能够显著降低强迫症大鼠海马中的谷氨酸水平,并显著抑制NMDAR的NR2A或NR2B亚基,这些结果提示,DCS,NVP-AAMO77和Ro25-6981可能是用于治疗强迫症的有效药物,这可能是因为抑制了NMDAR的NR2A或NR2B水平。