缩宫素是哺乳动物和人垂体后叶激素的主要成分之一,临床主要用于引产、促使排乳、子宫复位不良及预防产后出血等。缩宫素的生产,过去主要通过对猪、牛脑垂体的组织提取进行,现阶段主要通过固相合成的方法进行。无论是组织提取还是化学合成的缩宫素粗品都需要进行分离纯化,只有纯度达到一定的要求才可以作为药品使用。目前,缩宫素的分离纯化主要采用两步反相色谱的方法进行,该方法由于反相介质和流动相的成本较高以及介质损耗严重等导致分离纯化成本很高,分离纯化成本占到缩宫素产品成本的二分之一左右。因此,开发高效、廉价的分离纯化方法对缩宫素甚至多肽的发展都有着十分重要的意义。本研究以两种常用的氢键吸附介质作为分离纯化介质,对固相合成缩宫素粗品进行了分离纯化研究,建立了聚酰胺脱盐、Superose12纯化的生产工艺。该方法相对于传统反相色谱的方法具有介质便宜、容易清洗再生和介质利用率高等的特点,并且分离过程多使用水和酸作为流动相,分离纯化成本很低,并且安全环保。具体研究内容和结果如下:　　(1)建立了缩宫素的反相高效液相色谱分析方法。具体色谱条件为:Shimadzu LC-10ATHPLC系统;Agilent Eclipse XDB-C18色谱柱;流动相A:5％ACN+0.1%TFA,流动相B:90%ACN+0.1%TFA;梯度:0~20min,20%~50%B;流速1.0ml/min;柱温20℃;检测波长215nm;进样量20μl。该方法和传统反相高效液相色谱对多肽的分析方法相比,可以在较短的时间内得到较高的分辨率。适合于缩宫素固态粗品、液态粗品以及分离纯化后缩宫素样品的分析。　　(2)在聚酰胺色谱柱上通过不同浓度乙腈对缩宫素标准品的等度洗脱,对缩宫素在聚酰胺色谱柱上的保留机理进行了讨论,缩宫素在聚酰胺上的保留为氢键吸附和疏水作用共同作用的模式。　　(3)建立并优化了缩宫素固态粗品的聚酰胺纯水等度洗脱粗分离的方法,该方法对固态粗品可以实现很好的脱盐和一定的粗分离效果。在优化后的分离条件下,对固态粗品的粗分离纯度可达65.8%,回收率为72.1%。和传统的中低压反相C18的脱盐粗分离比,分离效果相当,但聚酰胺的方法具有更高的样品载量,和更低的分离纯化成本,并且有利于环境的保护。　　(4)对缩宫素在Superose12色谱柱上的吸附机理进行了讨论,缩宫素在Superose12上的保留为氢键吸附和离子作用的混合模式。并建立了醋酸梯度洗脱对缩宫素粗品的分离纯化方法。　　(5)对缩宫素固态和液态粗品的直接一步Superose12分离纯化结果表明,粗品中的盐类对Superose12的分离纯化有较大的影响,使用Superose12对缩宫素粗品进行分离纯化时,必须对样品进行脱盐处理。　　(6)建立了聚酰胺脱盐、Superose12纯化两步法对缩宫素粗品的分离纯化的方法,在最优的Superose12进样条件下,对聚酰胺脱盐样品的纯化纯度可达95.4%,回收率达87.9%,总回收率为63.4%。