研究背景和目的：脑血管病严重危害人类的健康，发病率逐渐增加，给家庭和社会带来沉重负担。虽然近年对于脑卒中的治疗取得了一定的进展，但其预后仍不尽人意，尤以缺血性脑卒中的预后差。缺血后大量脑神经元细胞因缺血缺氧损伤而发生不可逆性的变性坏死，终致严重的神经功能缺失。近年来研究发现，啮齿类、非人灵长类、人类成年侧脑室室下区（subventricular zone，SVZ）和海马齿状回（dentate gyrus，DG）亚颗粒区（subgranular zone，SGZ）存在神经干细胞（neuralstem cells，NSCs）或神经祖细胞（neural progenitor cells，NPCs）。这些NSCs在脑缺血后被激活，增殖分化成功能上成熟的神经元，整合到固有神经网络中，可一定程度上起到部分补充并修复神经损伤的作用。但是脑缺血后自身NSCs增殖分化能力十分有限，还远不能达到临床治疗要求。故而，最大限度地提高脑缺血后NSCs增殖分化能力是治疗的关键，而深入探讨脑缺血后成体NSCs增殖分化的分子调控机制则是我们解决这一问题的基础和前提。微小RNA（microRNAs，miRNAs）是在真核生物中发现的一类单链小分子非编码RNA，可通过转录后水平调控靶基因蛋白的表达，其参与了多种生物学过程，发挥着重要的生物学功能。miR-124为脑组织特异性表达的miRNAs，其在中枢神经系统(central nervous system，CNS)内含量非常丰富，据最新研究报道，miR-124可调控NSCs增殖分化过程。然而，脑缺血损伤后miR-124表达是否发生改变，其是否仍然参与调控NSCs增殖分化过程，目前报道甚少。本研究通过检测脑缺血后不同时间点缺血SVZ区miR-124及其靶基因Sox9mRNA的表达水平，初步探讨微小RNA对脑缺血后NSCs增殖分化的调控作用。研究内容和方法：1.脑缺血Sprague-Dawley（SD）大鼠模型的建立和实验分组SD大鼠随机分假手术组和脑缺血组，缺血组采用线栓法制作大鼠大脑中动脉栓塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型，于大脑中动脉栓塞再灌注后各时间点（1d、3d、7d）处死，取脑组织SVZ区标本待检。2.脑缺血后SVZ区内源性NSCs的增殖情况采用免疫荧光染色检测假手术组、脑缺血组各时间点SVZ区Nestin阳性细胞的表达。3.脑缺血后SVZ区miR-124表达变化取假手术组、脑缺血组各时间点SVZ标本，采用real-time PCR方法检测脑缺血各组miR-124表达水平。4.脑缺血后SVZ区miR-124靶基因Sox9mRNA表达变化取假手术组、脑缺血组各时间点SVZ标本，采用real-time PCR方法检测脑缺血各组Sox9mRNA表达水平。结果：1.成功建立脑缺血SD大鼠模型MCAO大鼠均出现程度不等的对侧肢体偏瘫、向对侧倾斜等神经功能缺失表现。2,3,5—氯化三苯基四氮唑（2,3,5-triphenyl-2h-tetrazolium chloride, TTC）染色可见右侧缺血区呈苍白色，正常脑组织呈粉红色。脑缺血损伤模型制作成功。2.内源性NSCs的增殖情况免疫荧光染色结果显示：脑缺血组（1d、3d、7d）SVZ区，其Nestin阳性细胞数显著高于假手术组。阳性细胞计数分别为假手术组的3.0±0.13、4.5±0.24、6.5±0.29倍。结果提示，脑缺血后可诱导SVZ区NSCs增殖。3.脑缺血后SVZ区miR-124和Sox9mRNA表达变化3.1miR-124的表达变化real-time PCR结果显示：与假手术组相比，脑缺血组（1d、3d、7d）SVZ区miR-124表达均显著高于假手术组，分别为假手术组的2.12±0.23、3.56±0.34、2.85±0.27倍(P<O．05)。结果提示，脑缺血可上调miR-124的表达。3.2Sox9mRNA表达变化real-time PCR结果显示：与假手术组相比，脑缺血组（1d、3d、7d）SVZ区Sox9mRNA表达均显著低于假手术组，分别为假手术组的0.61±0.11、0.13±0.15、0.19±0.21倍(P<O．05)。结果提示，脑缺血可下调Sox9mRNA的表达。结论：1.脑缺血损伤后可刺激脑SVZ区内源性NSCs的增殖。2.脑缺血后SVZ区miR-124表达显著上调，靶基因Sox9mRNA显著下调，提示miR-124/Sox9信号通路可能参与了脑缺血后SVZ区NSCs增殖分化过程的调控。