论文部分内容阅读
DNA电化学生物传感器的研究一直是一个热点,这是出于其在生物分析化学中具有潜在的应用价值,比如疾病诊断、药物研究及通过遗传改良的生物体内转基因的检测等。近年来随着对量子点研究的深入及其应用范围的扩大,量子点在生物化学、细胞生物学、免疫生物学等学科的研究中显示了巨大的发展潜力,特别是量子点作为标记物用于生物分析,很有应用前途。本论文以硒化物量子点标记DNA探针,制备DNA电化学生物传感器,实现了对目标基因DNA特定序列的高灵敏检测。主要包括以下内容:
将硒化物量子点作为寡聚核苷酸探针的标记物,用于转基因植物外源基因序列片段的检测。在水相中分别合成了表面修饰有十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)的PbSe量子点,表面修饰有聚乙烯吡咯烷酮(PVP)的Ag2Se量子点及表面由谷氨酸修饰的PbSe量子点,将其分别通过静电作用、氢键作用及共价作用与不同DNA探针结合,完成量子点对探针序列的标记,利用紫外-可见吸收光谱对量子点标记探针进行了表征:将目标序列通过共价键合及静电吸附的方式固定在羧基化碳纳米管修饰的碳糊电极或者十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)修饰的碳糊电极表面,在一定条件下使量子点标记ssDNA探针与固定化的目标ssDNA序列杂交,利用硝酸溶解固定在杂交产物上的量子点,分别利用微分脉冲阳极溶出伏安法及极谱络合吸附波法检测溶解产生的金属离子的信号,从而间接完成对目标ssDNA序列的电化学检测。
利用量子点标记电化学杂交分析方法对转基因植物外源基因序列片段(CaMV35S、PEP、PAT)进行了检测。结果表明,本实验方法对特定序列的检测有较高的灵敏度和选择性,可以较好的识别与目标序列相关的碱基错配序列和非互补序列。