Faecalibacterium prausnitzii对实验性溃疡性结肠炎大鼠Foxp3+Treg细胞及细胞因子的影响

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背景与目的:Foxp3+Treg细胞是一种免疫调节细胞,在免疫调节及维持机体免疫平衡中起重要作用。本实验通过建立溃疡性结肠炎(UC)大鼠模型,研究Faecalibacterium prausnitzii(以下简称FP)细菌对大鼠UC的治疗作用,以及对大鼠外周血和脾脏中CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞及相关细胞因子的影响,初步探讨FP细菌治疗UC的作用机制。方法:60只Sprague-Dawley大鼠随机分为正常对照组(A组)、结肠炎组(B组)、FP细菌组(C组)、FP上清液组(D组)、培养基组(E组)、双歧杆菌组(F组);采用2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)法(80mg/KgTNBS+50%的乙醇)诱导复制UC大鼠模型。观察大鼠的生存状态,实验7天后处死大鼠,结肠组织行病理学检查和评分;流式检测外周血和脾脏中CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞的含量,酶联免疫吸附(ELISA)检测血浆中细胞因子IL-6、IL-10、IL-12和TGF-β1的含量,气相色谱法测定大鼠粪便内短链脂肪酸的含量。结果:与结肠炎组(B组)相比,FP细菌(C组)、FP上清液组(D组)和双歧杆菌组(E组)结肠大体形态损伤显著改善。B组大鼠外周血和脾脏CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞含量分别为2.21±0.75%和3.15±0.45%,粪便内短链脂肪酸的含量为33.52±9.5μmol/g,与A组大鼠相应数据(3.24±0.66%、4.19±1.02%、43.19±9.5μmol/g)相比均显著降低(P<0.05)。经FP细菌、FP上清液和双歧杆菌治疗1周后,大鼠外周血中CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞含量分别为2.97±0.44%、3.33±0.51%和2.64±0.91%;脾脏中CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞含量分别为3.87±0.92%、5.99±1.82%和3.27±1.51%。短链脂肪酸的含量分别为39.63±14.51μmol/g,43.67±13.98μmol/g和36.93±8.4μmol/g;C组、D组与B组比较均有显著增高(P<0.05;P<0.01)。B组IL-6和IL-12的含量显著升高,IL-10和TGF-β1含量显著降低,IL-10/IL-12的比值显著降低,分别为111.48±10.34pg/ml、185.48±13.35pg/ml、87.17±3.2pg/ml、71.31±5.32pg/m1和0.47±0.21,与A组相应数据(49.41±5.79pg/ml、91.56±7.53pg/ml、94.31±5.25pg/ml、109.68±6.54pg/ml、1.03±0.20)相比有显著差异性(P<0.05)。与B组相比,C组、D组和F组血清中IL-10的含量(分别为107.71±5.90pg/ml、108.84±4.17pg/m1、116.15±3.28pg/m1)显著升高(P<0.05),IL-6的的含量(56.70±5.82pg/m1、51.19±6.47pg/ml、55.39±7.87pg/m1)和IL-12的含量(100.66±9.01pg/ml、111.07±8.70pg/ml、109.58±7.90pg/m1)显著降低(P<0.05);IL-10/IL-12的比值(1.07±0.67,0.98±0.34,1.06±0.38)显著增高(P<0.05);TGF-β1的含量(302.02±2.23pg/ml、270.17±2.32pg/m1、118.09±3.97pg/m1)显著增高(P<0.05)。E组与D组相比,外周血和脾脏CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞含量(分别为2.15±0.3%、3.70±0.73%)显著下降(P<0.05),粪便内短链脂肪酸含量(27.02±11.02μmol/g)显著下降(P<0.05),IL-10(84.24±3.00pg/m1)和TGF-β1(108.65±3.00pg/ml)的含量显著下降(P<0.05),IL-6(108.27±8.14pg/m1)和IL-12(179.24±11.31pg/m1)的含量显著升高(P<0.05),IL-10/IL-12的比值(0.47±0.29)显著下降(P<0.05)。结论:FP细菌及其上清液对TNBS诱导的实验性溃疡性结肠炎大鼠有显著的治疗作用,其机制可能与提高外周血和脾脏中CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞比例和升高外周血中TGF-β1和IL-10/IL-12的比值并降低IL-6的含量有关。
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