论文部分内容阅读
目的:
口腔正畸治疗中,由于各类矫治器的使用,破坏了口腔生理自洁作用和口腔正常菌群的动态平衡,使菌斑易堆积于矫治器周围,引起龋病、牙龈炎、牙周炎、种植体周围炎等细菌感染性疾病。317L-Cu抗菌不锈钢不仅具有优良的理化性能,而且具有卓越的抗菌性能,若能应用于临床治疗中,可在一定程度上减少细菌感染的发生。本实验旨在观察317L-Cu抗菌不锈钢对L929细胞生长、黏附、增殖等生物学行为的影响,通过与临床常用的医用不锈钢以及医用纯钛材料进行比较,评价抗菌不锈钢的生物相容性,并与纯铜材料进行比较,观察不同浓度Cu2+对生物相容性的影响,为317L-Cu抗菌不锈钢进一步的研究和临床应用提供生物学证据。
方法:
采用体外实验的方法对317L-Cu抗菌不锈钢进行相关研究,选择小鼠成纤维细胞L929细胞系作为实验对象,将实验材料分为317L-Cu抗菌不锈钢、317L医用不锈钢、医用纯钛、纯铜四个实验组,并设立阴性对照组和阳性对照组(铅)。分别进行细胞形态学观察、CCK-8实验和细胞黏附实验研究317L-Cu抗菌不锈钢对细胞生物学行为的影响:通过倒置相差显微镜观察L929细胞在四种材料的浸提液中的生长情况;采用CCK-8活细胞计数法检测L929细胞在不同材料浸提液中培养24 h、48 h、72 h的OD值并计算得出细胞相对增殖率,判断细胞毒性级别;应用吖啶橙染色法在荧光显微镜下观察细胞黏附于材料表面的形态、数量以及生长情况并进行细胞计数。
结果:
细胞形态学观察结果:各时间点,317L-Cu抗菌不锈钢组、317L医用不锈钢组、医用纯钛组、阴性对照组细胞贴壁生长状态均良好,轮廓清晰,胞体饱满,细胞排列密集规则,而纯铜组和阳性对照组细胞生长状态异常,随着培养时间的延长,细胞折光性增强,胞体皱缩或细胞溶解,细胞核固缩,呈严重中毒形态。
CCK-8实验结果:随着培养时间的延长,除纯铜组外,317L-Cu抗菌不锈钢组、317L医用不锈钢组、医用纯钛组、阴性对照组的光密度值均相应的增加。各时间点:317L-Cu抗菌不锈钢组在细胞增殖率均低于医用纯钛组(24 h、72 h:P<0.05;48 h:P>0.05)而高于317L医用不锈钢组(P<0.05),细胞毒性分级为1级,纯铜组细胞毒性细胞增值率明显低于其他各组(P<0.05),细胞毒性分级为3级和4级。
细胞黏附实验结果:荧光显微镜下可见细胞呈多角形或梭形,铺路石样排列,随着培养时间的延长,细胞在材料表面的黏附数量,除纯铜组下降外,其他各组均逐渐增加。各时间点:317L-Cu抗菌不锈钢组的细胞黏附数量均低于医用纯钛组(24 h、72 h:P<0.05;48 h:P>0.05)而高于317L医用不锈钢组(P<0.05),纯铜组的细胞黏附数量明显少于其他各组(P<0.05)。
结论:
317L-Cu抗菌不锈钢对细胞的生长、黏附、增殖等生物学行为无明显不良影响,具有良好的生物相容性,而纯铜材料具有明显的细胞毒性;Cu2+的细胞毒性表现为双向性。