论文部分内容阅读
[目的]通过实验方法测定乳铁蛋白在人脑胶质瘤中的表达情况,分析乳铁蛋白在人脑胶质瘤中的表达及意义；通过研究不同浓度乳铁蛋白在体外脑胶质瘤细胞C6中对VEGF和bFGF的影响,初步探讨其通过影响VEGF及bFGF影响肿瘤的机制。[方法l收集中南大学湘雅医院神经外科2012年手术切除胶质瘤标本46例(其中低级别胶质瘤27例(Ⅰ级、Ⅱ级及Ⅱ级～Ⅲ级)和高级别胶质瘤19例(Ⅲ级和Ⅳ级),通过免疫组化SP法、RT-PCR和Western-Blot方法测定不同级别组胶质瘤中乳铁蛋白的表达情况并分析二者的相关性；另取急性颅脑损伤后非功能区非肿瘤脑组织(正常脑组织)10例作为对照。观察乳铁蛋白对神经胶质瘤细胞株C6细胞中VEGF和bFGF的影响,按乳铁蛋白浓度为0.006、0.013、0.025、0.050g/L将实验分为4组,另设空白对照组1个,通过RT-PCR方法和Western-Blot方法测定体外C6细胞中VEGF和bFGF基因和蛋白的表达情况,并分析其相关性。[结果]乳铁蛋白在非功能区非肿瘤脑组织及不同级别胶质瘤中的表达情况不同,免疫组化SP法测定其在低级别胶质瘤中有表达,略低于非肿瘤脑组织；而在高级别胶质瘤中表达显著减少或者不明显,显著低于低级别胶质瘤和非肿瘤脑组织(P<0.05)。RT-PCR和Western-Blot方法测定也证实乳铁蛋白在非肿瘤脑组织组和低级别胶质瘤中的表达高于高级别胶质瘤(P<0.05),二者的差异具有统计学意义。不同浓度乳铁蛋白对胶质瘤C6细胞中VEGF和bFGF基因及蛋白表达有影响,随着乳铁蛋白浓度的增加,VEGF和bFGF的基因及蛋白表达量逐渐降低,组间有差异(P<0.01),乳铁蛋白对VEGF和bFGF的表达有抑制作用。[结论]乳铁蛋白在非肿瘤脑组织和不同级别胶质瘤中的表达有差异,这一结论提示乳铁蛋白可能参与了人脑胶质瘤发生与发展的过程。高级别胶质瘤的高度恶性和高侵袭性可能是因为乳铁蛋白表达的下调丧失其对肿瘤细胞的抑制作用所致。不同浓度乳铁蛋白对胶质瘤C6细胞中VEGF和bFGF的表达有影响,随着乳铁蛋白浓度的增加,VEGF和bFGF的表达量逐渐降低,说明乳铁蛋白可以通过抑制VEGF和bFGF而抑制肿瘤的血管生成,从而达到抑制胶质瘤细胞生长的作用,这一途径可能是乳铁蛋白抑制胶质瘤发生发展的机理之一。