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肠易激综合征(Irritable Bowel Syndrome,IBS)是公认的临床高发和疑难疾病,主要症状为腹痛或腹部不适,且伴有腹泻、便秘等排便异常症状。内脏高敏感性是肠易激综合征发病机制中重要的病理生理学基础,本研究探索了柴术宁肠方及其有效组分对内脏高敏感性模型大鼠及5-HT信号通路的影响。研究工作主要分为3个部分:1.运用复合应激法构建内脏高敏感性大鼠模型。每天随机给予大鼠2种刺激(断水,禁食,湿笼饲养,强迫游泳,管道束缚),连续21天,造模结束后,与正常组比较,模型组一般状态(体重,外观行为评分)、肠道感觉(腹部撤回反射、最小容量阈值)均有显著性差异(P<0.01),结果显示模型构建成功。2、研究柴术宁肠方对模型大鼠5-HT通路的影响。用酶联免疫法检测大鼠血清5-HT水平,结肠TPH1,SERT,5-HT3R,5-HT4R水平;实时荧光定量法检测结肠TPH1,SERT,5-HT3R,5-HT4R mRNA的表达。与模型组相比,柴术宁肠方组大鼠体重增长放缓(P<0.01),可显著升高模型大鼠的外观行为评分(P<0.05)和最小容量阈值(P<0.01);在 20mmHg,40mmHg,60mmHg,80 mmHg压力下,柴术宁肠方组显著降低模型大鼠腹部撤回反射评分(P<0.05)。模型组血清5-HT和结肠的TPH1,5-HT3R水平及mRNA水平表达明显增高和上调(P<0.01,P<0.05);结肠SERT,5-HT4R水平及mRNA表达显著降低和下调(P<0.05)。与模型组比较,柴术宁肠方血清5-HT和结肠TPH1水平明显下调(P<0.01,P<0.05);结肠5-HT3R水平及mRNA表达显著下调(P1<0.05);结肠SERT,5-HT4R水平及mRNA表达显著上调(P<0.05)。3、研究柴术宁肠方有效组分(芍药苷、甘草酸、辛弗林)对模型大鼠5-HT通路的影响。采用ELISA法测定大鼠结肠的5-HT通路重要标志蛋白水平,qRT-PCR法测定大鼠结肠的5-HT通路重要标志蛋白的mRNA水平。芍药苷组、甘草酸组、辛弗林组及芍药苷-甘草酸、芍药苷-辛弗林组可显著改善内脏高敏感模型大鼠一般状态(体重、外观行为评分),缓解内脏高敏感性(腹部撤回反射评分、最小容量阈值)。且甘草酸高剂量组效果优于甘草酸低剂量组(P<0.05);芍药苷-甘草酸组和芍药苷-辛弗林组抑制模型大鼠体重减轻趋势优于单一有效成分组(P<0.01)。与正常组相比,模型组大鼠结肠中5-HT含量、5-HT转化率和5HT3R,TPH1蛋白水平及mRNA水平显著升高(P<0.05,P<0.01),模型组大鼠结肠5-HT4R和SERT蛋白水平及mRNA水平显著降低(P<0.05,P<0.01)。与模型组相比,芍药苷-甘草酸组和芍药苷-辛弗林组大鼠结肠中5-HT含量、5-HT转化率和5HT3R、TPH1蛋白水平及mRNA水平显著下降(P<0.05,P<0.01);芍药苷-甘草酸组和芍药苷-辛弗林组大鼠结肠中5HT4R和SERT蛋白水平及mRNA水平显著升高(P<0.05),效果优于各单一有效成分组。综上所述,柴术宁肠方及其有效组分对内脏高敏感模型大鼠的一般状态及肠道感觉有显著的改善作用;同时对内脏高敏感模型大鼠5-HT信号通路的蛋白水平和mRNA水平都有显著的调节作用。本研究对阐明柴术宁肠方及其有效成分组合的作用机理具有理论意义,对于肠易激综合征新药开发具有指导意义。