黄曲霉毒素（Aflatoxins,AFT）是毒性和危害性最强的真菌毒素之一,而在所有黄曲霉毒素中黄曲霉毒素B1（AFB1）的毒性最强,且分布最广,不仅严重威胁了粮食和饲料的安全性和经济性,同时对人类和家畜的危害也极大,给我国及全球经济带来了巨大的损失。研究霉变粮食和饲料中黄曲霉毒素B1的脱毒机制具有重要的意义和应用价值。传统的理化法作用机制和反应条件比较剧烈,会给粮食和饲料带来二次污染或影响其营养价值和品质。因此,采用高效、无污染、处理条件温和的生物法去除黄曲霉毒素是目前的研究热点。本实验从土壤样品中筛选出能够高效降解AFB1的菌株并对其进行种属鉴定,初步研究了降解菌株对AFB1的生物降解特性以及其在发霉玉米粉中的应用,探究了具有降解作用的活性成分所存在发酵液中的组分以及温度、蛋白酶K对其稳定性的影响,并通过硫酸铵分级沉淀、阴离子交换层析等方法对其活性成分进行初步的分离和粗提,验证其降解活性。结果如下:本实验利用以香豆素为唯一碳源的培养基进行初筛,从土壤及发霉粮食中分离出了35个生长较好的菌株;通过HPLC检测加入培养基中AFB1标品含量的变化进行复筛,分离出9个能够高效降解AFB1的菌株,它们对AFB1的降解率均超过60%,其中从发霉的玉米中分离出的菌株对AFB1的降解率最高可达到91.46%,命名为YM-1。通过观察菌落特征和细胞形态及16S rDNA基因测序及序列比对进行分析鉴定,菌株YM-1为铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa）。选择铜绿假单胞菌YM-1为对象,进行降解特性研究。对铜绿假单胞菌YM-1降解特性研究表明,发酵96 h后可降解NB培养基中90.70%的AFB1,其中在24 h至36 h内降解地最快,在48 h时降解率达到了 82.99%。其中具有降解作用的活性物质主要位于发酵上清液中,同时YM-1细胞体对AFB1也具有一定的吸附作用。对发酵上清液进行蛋白酶K处理后,其AFB1降解率明显降低,但经过热处理后的发酵上清液的降解率却有所提高,可初步判断铜绿假单胞菌YM-1上清液中可能含有某种热稳定性较好的蛋白类物质对AFB1具有降解活性。随后通过硫酸铵分级沉淀、阴离子交换层析等方法对铜绿假单胞菌YM-1上清液中的降解活性成分进行初步的分离和粗提,研究结果表明,0-40%饱和度的硫酸铵沉淀可对YM-1上清液中的降解活性物质进行初步的分离,但阴离子交换层析未能将其分离。在经过SDS-PAGE和Native-PAGE两种蛋白凝胶检测验证后,排除了具有降解AFB1活性的物质为蛋白质的猜想。对铜绿假单胞菌YM-1上清液中的多糖类组分进行粗提取后发现YM-1上清液中的胞外多糖类物质可使AFB1的含量降低56.92%,与上清液60.47%的降解率的结果相一致,但具体是否是微生物胞外多糖对AFB1的吸附作用,还需要进一步的实验验证。对铜绿假单胞菌YM-1在发霉玉米粉中降解作用的研究表明,在接种YM-1发酵液进行半固态反应的6 d内,发霉玉米粉中的AFB1的含量降低了 88.87%。本实验为铜绿假单胞菌在粮食和饲料中生物降解AFB1提供了一定的理论基础,具有现实意义。