MPTP致帕金森病模型小鼠脑内DAT,5-HT<,1A>和5-HTT变化的研究

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通过建立1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶( 1-methy-4-phenyl-1, 2, 3, 6-tetrahy-dropyridine ,MPTP)诱导的帕金森病(Parkinson’s disease,PD)小鼠模型,运用特异的分子影像药物协同免疫组化等方法,来观察小鼠脑内多巴胺转运体(dopamine transporter,DAT )、5-羟色胺1A受体(serotonin 1A receptor,5-HT1A)和5-羟色胺转运体(serotonin transporter,5-HTT)的变化。同时,观察模型小鼠的运动机能损伤与MPTP剂量和时间的关系。8周龄雄性C57BL/6小鼠随机分为3组,腹腔注射MPTP,建立PD模型小鼠。高剂量组为80mg/kg,每2小时注射20mg/kg一次,共4次;低剂量组为20mg/kg,单次注射;同时设生理盐水对照组。注射MPTP前1天和注射后第1天、第4天、第7天和第10天进行行为学研究。第11天用放射自显影法、脑生物学分布实验测定3组小鼠脑中DAT、5-HTT和5-HT1A的相对含量,并用免疫组化法测定TH、5-HTT及5-HT1A阳性细胞数。与对照组相比,模型鼠脑内DAT、5-HTT和5-HT1A的含量分别有减少,且MPTP用量越高减少得越多。放射自显影法结果显示高剂量组较对照组DAT、5-HTT和5-HT1A的含量分别减少了80%(P<0.001)、67%(P<0.001)和75%(P<0.001),脑内分布显示分别减少了81% (P<0.001)、34%(P=0.324)和52%(P<0.05),免疫组化显示分别减少了54%(P<0.001)、41%(P<0.001)和46%(P<0.001)。行为学测试结果显示,小鼠步伐在受到MPTP损伤后与对照组比较出现了双时相变化:在第1时相步伐增大(P<0.001),随后恢复;在第2时相步伐减小(P<0.05)。MPTP对模型小鼠脑内DA系统和5-HT系统造成严重损伤,但DA系统受损伤程度要大于5-HT系统的受损程度;MPTP对中枢神经系统的毒性影响存在明显的剂量-效应关系; PD模型小鼠的运动机能与时间和MPTP剂量有着密切的关系。
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