连续棒状离子交换色谱柱是近年来发展的一种新型高效液相色谱柱,已广泛应用于蛋白质、肽、核酸、寡核苷酸以及多糖的分离和纯化。它的优点是:1)具有开放性支持骨架,大分子可以自由进入和迅速扩散,可用于快速分离和制备;2)具有多孔性,表面积大、交换容量大;3)具有亲水性,对大分子的吸附较弱,不致引起生物大分子变性或酶的失活,活性回收率高;另一方面,它还可以作为固相萃取(SPE)介质用于痕量样品分析前的预富集,与常规富集方法相比,具有有机溶剂用量少、便捷、安全、高效、易实现自动化在线分析等特点。 本文通过原位聚合之后在线化学修饰的方法合成了连续棒状离子交换柱,研究了它对于生物大分子的吸附特性,以及在阴离子的在线富集和测定中的应用。全文共分三部分。 第一章:综述了离子交换色谱法中有机基质、无机基质以及复合基质固定相的研究进展,并对其在生化研究中的应用作了介绍。 第二章:直接以色谱柱管为模具,通过原位聚合之后在线化学修饰的方法合成了连续棒状弱阳离子交换柱;考察了不同流动相体系、流速、温度、pH值对标准蛋白(溶菌酶和牛血清白蛋白)在该色谱柱上色谱行为的影响。结果表明该色谱柱对碱性蛋白有明显的吸附作用,具有典型的弱阳离子交换柱的特性,可以用来进行碱性蛋白的分离纯化,且重现性和稳定性良好。 第三章:通过在线富集技术分析了样品中痕量的碘离子和硫氰根离子。两种阴离子被同时富集在分别用二乙胺或三乙胺在线修饰的聚甲基丙烯酸缩水甘油酯连续棒状阴离子交换柱上,然后以0.3mol/L的溴化钾溶液洗脱、分离,并用紫外检测器测定了两种阴离子的含量。结果表明键合二乙胺的连续棒状弱阴离子交换柱对碘离子和硫氰根离子有较强的富集和分离能力,可同时富集并测定环境或食品样品中痕量碘离子和硫氰根离子,方法简单可靠,色谱柱经再生之后可多次使用,效果良好。