1α-羟基维生素D3对肉鸡生长性能、骨骼发育、血浆生化指标及肠道磷转运蛋白mRNA表达的影响

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为评估1α-羟基维生素D3(1α-OH-D3)和维生素D3(VD3)的相对生物学效价及研究1α-OH-D3对肉鸡生长性能、血浆生化指标、钙磷表观消化率、骨骼矿化及肠道磷转运蛋白mRNA相对表达量的影响,进行如下试验,旨在探讨1α-OH-D3能否有效促进肉鸡肠道磷的吸收,为降低饲粮磷添加量、减轻环境磷污染提供科学依据。试验一1α-羟基维生素D3与维生素D3的相对生物学效价评估本试验选用1日龄健康罗斯308肉鸡公雏400只,随机分为8个处理,每处理5个重复,每重复10只鸡。试验期为21天。设计8种日粮,在基础饲粮(钙Ca 0.50%,非植酸磷NPP 0.25%)中分别添加5个水平VD3(0、2.5、5、10和20μg/kg)和3个水平1α-OH-D3(1.25、2.5和5μg/kg)。斜率比法测定1α-OH-D3与VD3的相对生物学效价。试验结果如下:(1)1α-OH-D3与VD3水平均线性增加121日龄肉鸡体增重、采食量、血浆Ca含量(P<0.05);肉鸡胫骨、股骨和跖骨重量、长度、宽度、灰分重量和含量、钙和磷含量与1α-OH-D3、VD3水平呈线性相关关系(P<0.05)。(2)以121日龄肉鸡体增重、采食量和血浆Ca含量为评价指标,1α-OH-D3生物学效价分别是VD3的4.78、4.75和4.21倍;以121日龄肉鸡胫骨重量、长度、宽度、灰分重量和含量、钙和磷含量为评价指标,1α-OH-D3生物学效价分别是VD3的5.16、4.42、4.70、5.03、4.46、4.70和4.79倍;以121日龄肉鸡股骨重量、长度、宽度、灰分重量和含量、钙和磷含量为评价指标,1α-OH-D3生物学效价分别是VD3的5.09、4.43、3.19、5.83、5.21、5.27和5.31倍;以121日龄肉鸡跖骨重量、长度、宽度、灰分重量和钙含量为评价指标,1α-OH-D3生物学效价分别是VD3的5.00、4.05、5.94、4.73和5.64倍。(3)以121日龄肉鸡生长性能和骨骼矿化指标综合评价,1α-OH-D3的生物学效价约为VD3的4.83倍。试验二1α-OH-D3对肉鸡生长性能、血浆生化指标、骨骼矿化及肠道磷转运蛋白mRNA表达量的影响本试验选用1日龄健康罗斯308肉鸡公雏250只,随机分为5个处理,每处理5个重复,每重复10只鸡。试验期为21天。前4种分别在基础饲粮(Ca 0.50%,NPP 0.25%,无VD3)中添加4个水平1α-OH-D3(0、1.25、2.5和5μg/kg)。第5种为正对照组:Ca 1.00%,NPP 0.45%,VD3 25μg/kg。试验期间统计生长性能相关数据,饲养至21日龄,进行屠宰,采集肠道、肝脏与肾脏组织(每重复1只鸡),根据目的基因相关序列设计引物,采用实时荧光定量RT-PCR技术分析目的基因表达量。试验结果如下:(1)与基础日粮组比较,1.25、2.5和5μg/kg的1α-OH-D3显著提高121日龄肉鸡体增重、采食量、饲料效率、钙磷利用率及沉积量(P<0.05);5μg/kg 1α-OH-D3添加组肉鸡的生长性能与正对照组(1.00%Ca,0.45%NPP)差异不显著(P>0.05)。(2)与基础日粮组比较,1.25、2.5和5μg/kg的1α-OH-D3显著增加血浆Ca、无机磷浓度(P<0.05),降低血浆谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)、肌氨酸酐(CRE)和总蛋白质(TP)含量(P<0.05)。(3)与基础日粮组比较,1.25、2.5和5μg/kg的1α-OH-D3显著增加121日龄肉鸡胫骨和股骨重量、长度、宽度、灰分重量和含量、钙和磷含量(P<0.05);5μg/kg 1α-OH-D3组肉鸡胫骨、股骨重量、灰分含量与正对照组无显著差异(P>0.05)。(4)与基础日粮组比较,1.25、2.5和5μg/kg的1α-OH-D3显著增加121日龄肉鸡肝脏25-羟化酶及肠道细胞核维生素D受体(n VDR)、Ⅱb型磷转运蛋白(Na Pi-Ⅱb)、蛋白激酶C信号通路因子PKCα和PKCβmRNA相对表达量(P<0.05)。在肾脏,1α-OH-D3水平上调n VDR mRNA相对表达量(P<0.05);Ⅱa型磷转运蛋白(Na Pi-Ⅱa)和Ⅱc型磷转运蛋白(Na Pi-Ⅱc)mRNA相对表达量随1α-OH-D3水平提高呈增加趋势。5μg/kg 1α-OH-D3组肉鸡相关基因表达量均达到正对照组水平。
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