PEG2000-小胶质细胞混合移植治疗大鼠脊髓损伤的可行性研究

来源 :延安大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:solonxpl
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:观察小胶质细胞在不同浓度聚乙二醇2000(PEG2000)环境中的细胞状态,并确定适合用于小胶质细胞移植的浓度。进而以PEG2000与小胶质细胞混合移植对脊髓损伤大鼠进行治疗,并评估此治疗方式对脊髓损伤大鼠术后恢复的作用。方法:第一部分,从出生1-2天大鼠幼崽脑组织中分离纯化得到原代小胶质细胞。分别在含5%、10%、30%三种浓度PEG2000的细胞培养基中培养,分别用5%、10%、30%三种浓度PEG2000培养小胶质细胞,用CCK-8法、划痕实验、流式细胞分析、免疫印迹和免疫细胞化学染色等方法分别检测细胞活力,小胶质细胞对划痕损伤的迁移能力,吞噬能力以及对脂多糖(LPS)刺激反应的活化表型。第二部分,将第一部分体外培养实验筛选出的最适PEG2000培养浓度用于在体移植实验摸索小胶质细胞移植条件,包括尖端刺入脊髓的深度及进样速度等;并对移植细胞在体内的存活状态进行观察。第三部分,使用PEG2000作为介质将小胶质细胞移植到脊髓损伤大鼠的病灶,使用BBB评分评估脊髓损伤大鼠后肢运动功能,并在术后21天取材,免疫组化染色评估各组病灶面积大小、瘢痕形成情况及凋亡细胞数量。结果:第一部分,CCK-8法检测细胞活力发现,与对照组相比,5%、10%浓度PEG2000的细胞培养基培养对小胶质细胞活性没有影响,30%PEG2000细胞培养基中的小胶质细胞活性明显下降。免疫印迹与免疫细胞化学染色结果显示,不同浓度的PEG2000培养基环境不影响静息的原代小胶质细胞NF-κB p65的水平,而随着培养基环境中PEG2000浓度的增加i NOS表达水平逐渐降低,因此从免疫印迹角度看,PEG2000可以抑制小胶质细胞的炎性反应。并且,30%浓度的PEG2000培养基环境中小胶质细胞Arg-1表达相比对照组明显升高,有抗炎性转化的倾向。更重要的是,当LPS刺激6 h时,不同浓度PEG2000培养基环境中的小胶质细胞的i NOS、NF-κB-p65表达与对照组相比均减少,且随着PEG2000浓度增加,i NOS、NF-κB-p65水平逐渐下降。LPS刺激12 h后,其结果与刺激6 h的结果类似。免疫细胞化学染色显示了与免疫印迹相一致的结果,LPS刺激6小时后,含有PEG2000细胞的培养基中小胶质细胞i NOS表达是减低的,与之相反小胶质细胞Arg-1表达升高。LPS刺激12小时候后,随着培养基中PEG2000浓度的升高,小胶质细胞i NOS表达逐渐减低的,与之相反小胶质细胞Arg-1表达是升高的。在炎性刺激环境中,较低浓度的PEG2000(例如5%、10%)有抑制小胶质细胞炎性反应的倾向,并促进小胶质向抗炎表型转变。第二部分,将第一部分体外培养实验筛选出的最适小胶质细胞生存的PEG2000浓度用于在体移植实验,摸索出尖端刺入脊髓的深度为1.2 mm,进样速度为50nl/min进行细胞移植最合适,并在脊髓损伤病灶移植细胞后观察了术后21天内小胶质细胞的在体存活状态。第三部分,从第一部分实验结果得出10%以下的PEG2000浓度对小胶质细胞存活没有影响,将PEG2000与小胶质细胞混合移植到脊髓损伤大鼠的病灶,发现PEG2000联合小胶质细胞移植的脊髓损伤大鼠BBB评分明显恢复,免疫组化染色各组病灶面积大小及凋亡细胞数量也均好于其他组。结论:PEG2000具有良好的生物安全性,小胶质细胞在5%、10%浓度PEG2000环境中的能很好的存活,并且30%浓度的PEG2000诱导损伤病灶中小胶质细胞向M2抗炎表型转变,并且这种现象在LPS刺激的炎性环境中得到进一步强化;使用立体定位注射进行细胞移植是可行的;PEG2000和小胶质细胞混合移植对脊髓损伤大鼠进行治疗,可促进脊髓损伤大鼠术后运动功能的恢复,PEG2000协同损伤病灶中的移植小胶质细胞可能在脊髓损伤大鼠缩小病灶及减少组织等术后恢复过程发挥关键作用。
其他文献
<正>寿司是日本饮食文化中最为享誉世界的美食之一。拥有千年古老历史的寿司以其多样性、独特性俘获了诸多食客的心,世界各地的回转寿司店如今已数不胜数。店中身着白色工作服的厨师,会根据顾客的要求,将生鱼片、鱼籽、蟹肉等材料码在等宽的米饭块上,五颜六色,口味清香。让我们一起走进寿司的历史,去领略海浪声声中诞生的匠人精神。
期刊
<正>一、引言《中华人民共和国国民经济和社会发展第十四个五年规划和2035年远景目标纲要》提出,要打造数字经济新优势,加强关键数字技术创新应用,加快推动数字产业化,推进产业数字化转型。其中,数字经济重点产业包括云计算、大数据、物联网、工业互联网、区块链等(1)。2021年11月,财政部印发《会计改革与发展“十四五”规划纲要》,提出“十四五”时期,会计数字化进程要取得实质性成果,
期刊
近年来,我国并购重组活动愈演愈烈,并购溢价形成的大量商誉资产在后续计量时面临着减值问题。商誉减值意味着并购资产无法给公司带来预期收益,这种负面信息是否会引起企业价值波动?针对这一问题,以2008—2018年沪深A股上市公司为研究样本,考察商誉减值的价值相关性及其作用机制。研究发现,商誉减值通过降低企业股票流通性,造成公司股价和股票收益率下跌,企业价值毁损。在此基础上,从外、内部治理角度考察治理环境
2022年6月下旬至7月上旬,我国猪肉价格出现了快速上涨趋势,属于非正常的市场现象。价格上涨过快的主要原因是部分养猪企业存在非理性的压栏惜售现象,短期内加剧了市场惜售情绪。此外,由于6月下旬部分地区出现强降雨天气,造成生猪调运不畅,这些因素也推高了生猪价格。此外,2022年上半年猪肉进口量同比大幅度下滑也是造成国内生猪价格上升的原因之一。就目前我国能繁母猪和生猪存栏情况看,生猪产能总体稳定,至少2
《中共中央关于全面推进依法治国若干重大问题的决定》对深入推进依法治军从严治军问题作出了重大部署和安排,明确提出要提高国防和军队建设法治化水平。2022年3月7日,习近平在出席解放军和武警部队代表团全体会议时再次强调要贯彻依法治军战略,提高国防和军队建设法治化水平。军队院校教育是国防和军队建设的重要组成部分,加快推进军队院校教育法治化在全面提升国防和军队法治化水平进程中必然发挥着不可或缺的重要作用,
为了确定战斗部装药在快速烤燃条件下能稳定燃烧的临界泄压面积,本文基于质量守恒定律和气体状态方程建立了战斗部壳体内考虑炸药初始温度和排气孔排气的气体压强增长模型。以B炸药(Comp B)圆柱战斗部为研究对象,研究了炸药意外点火后能稳定燃烧的AV0/SB(临界泄压面积/炸药外表面积)确定方法,并与实验值进行了比较。结果表明本文建立的模型能够很好的预测B炸药战斗部的临界泄压面积。研究了战斗部炸药装药表面
在喷射器辅助供热的背景下,为了研究喷射器变工况特性,对国内外有关喷射器的计算方法进行调研,建立了喷射器计算模型并将模型与高背压机组进行耦合,得到喷射器变工况时工作蒸汽、引射蒸汽、喷射器背压、喷射器开度对喷射器性能的影响。结果表明:喷射器工作流体压力从0.25 MPa变化到0.45 MPa,工作流体质量流量先变大后变小,在工作蒸汽压力为设计工作蒸汽压力时喷射器性能最好;引射蒸汽压力提高,临界背压提高
语文知识有着人文性和工具性兼具的特点,其中,人文性是升华语文教学内涵的关键所在,也决定了语文课程和文化教育之间有着密不可分的联系。语文教学承担着引导学生接触优秀传统文化、传承优秀传统文化的重要职责,因此,作为优秀传统文化的重要组成部分——传统节日文化,也是语文教学的重要内容。在初中语文教学过程中,教师要积极在教学中渗透传统节日文化的知识,塑造学生健康的审美情趣,培养学生优秀的道德品质,引导学生关注