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酚氧化酶(phenoloxidase, EC.1.14.18.1,简称PO)又称络氨酸酶、儿茶酚氧化酶等,是结构复杂的多亚基的含铜氧化还原酶。它广泛存在于动物、植物、微生物、昆虫及人体内,位于黑素细胞的黄素体中,与黄素体膜结合,只有极小部分以游离形式存在。它是昆虫体内的一种重要酶类,在昆虫的变态发育和免疫系统中起着重要作用。由于酚氧化酶具有重要的理论意义和发展前景,大量的研究工作集中在此领域。本文以鞘翅目昆虫铜绿金龟子Anomala corpulenta Motsch幼虫酚氧化酶为试验对象,对其进行了部分纯化,研究了该酶的基本酶学特性,并以曲酸、熊果甙、桑黄素、槲皮素、4-已基间苯二酚和4-十二烷基间苯二酚等六种化合物为效应物研究其对该酶活性的抑制,并对其抑制参数及抑制动力学进行了研究。结果表明：1.经过35%饱和硫酸铵沉淀,铜绿金龟子幼虫酚氧化酶的最适温度为50℃,最适pH值为7.5,以L-多巴和邻苯二酚为底物时,铜绿金龟子幼虫酚氧化酶的Km分别为11.11mmol·L-1和9.52mmol·L-1。2.研究曲酸、熊果甙、桑黄素、槲皮素、4-已基间苯二酚和4-十二烷基间苯二酚对铜绿金龟子幼虫酚氧化酶活力的抑制作用,结果表明：以L-多巴为底物时,铜绿金龟子幼虫酚氧化酶对曲酸、桑黄素、槲皮素、4-已基间苯二酚和4-十二烷基间苯二酚敏感,其IC50分别为0.65mmol·L-、1.05mmol·L-1、0.146mmol·L-1、1.7μmol·L-1和1.2μmol·L-1。3.研究曲酸、熊果甙、桑黄素、槲皮素、4-已基间苯二酚和4-十二烷基间苯二酚对铜绿金龟子幼虫酚氧化酶活力的抑制作用类型,结果表明：以L-多巴为底物时,这六种效应物对铜绿金龟子幼虫酚氧化酶的抑制类型均为可逆性抑制类型。4.研究曲酸、熊果甙、桑黄素、槲皮素、4-已基间苯二酚和4-十二烷基间苯二酚对铜绿金龟子幼虫酚氧化酶活力的抑制作用机理,结果表明：以L-多巴为底物时,曲酸、桑黄素、槲皮素、4-已基间苯二酚和4-十二烷基间苯二酚这五种效应物对铜绿金龟子幼虫酚氧化酶的抑制作用均为竞争性抑制类型,其抑制常数(KI)分别为1.59mmol·L-1、0.54mmol·L-1、0.112mmol·L-1、1.52μmol·L-1和1.0μmol·L-1;熊果甙对铜绿金龟子幼虫酚氧化酶的抑制作用为非竞争性抑制类型,其抑制常数(KI)为2.98mmol·L-1。