从70年代至今，芽孢杆菌作为表达系统在应用中取得很多成果，通过它克隆表达了许多原核和真核基因。但由于对芽孢杆菌表达外源蛋白的研究还远远落后于大肠杆菌、毕赤酵母等已经商业化成熟的表达系统，而且芽孢杆菌表达系统还存在胞外蛋白酶对外源蛋白的降解和基因工程菌的遗传稳定性不佳等瓶颈，将芽孢杆菌用于生产生物蛋白产品的技术仍然集中于少数公司和个人，因此关于芽孢杆菌表达系统的研究具有很大的应用价值。表皮生长因子是一种强有力的细胞分裂促进因子，它不仅在上皮细胞，而且在间皮和内皮细胞发挥其生物效应，可在体内刺激皮肤组织、角膜、肺、气管上皮组织的生长繁殖、加速角膜创伤的修复、加速胃溃疡的治疗和抑制胃酸的分泌、增强表皮细胞的蛋白质、RNA的合成和细胞代谢、诱导新生眼睑的打开、对某些癌症的治疗有一定的疗效等。此外，作为生物活性添加剂，表皮生长因子可用于组织培养，同时也是化妆品生产的重要原料之一。随着相关功能和安全方面研究的深入，使得它在医药、化妆品等行业具有良好的开发前景。本研究的目的是探索利用枯草芽孢杆菌和短短芽孢杆菌系统来表达人源表皮生长因子基因。本文设计合成人表皮生长因子基因序列，构建使用Pgrac启动子配合枯草杆菌果聚糖蔗糖酶信号肽调控表达的枯草杆菌表达载体p05-gE和利用短短芽孢杆菌细胞壁蛋白多启动子及其信号肽调控表达的短短芽孢杆菌表达载体pNY-cwpE，分别转化枯草杆菌SCK6和短短芽孢杆菌HPD31-SP3对目的蛋白进行表达。经过摇瓶实验和SDS-PAGE电泳，在两株重组菌的培养液上清中均检测到了表达结果。本文还对短短芽孢杆菌的工程菌发酵条件进行了初步摸索，以可溶性淀粉作为碳源，以蛋白胨和酵母粉为氮源补料成分，在40L规模的发酵罐中经过48h的发酵周期，最终菌体湿重可达到80g/L，目的蛋白表达量约为200mg/L。此后本文又利用CM Sepharose F.F凝胶通过离子交换层析对含有目的蛋白的发酵产物进行一步纯化，并检测了纯化的表达产物对Balb/c3T3细胞的增殖活性。