马齿苋多糖提取、结构表征及抗氧化活性研究

来源 :天津科技大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:tianxiaowei2030
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马齿苋(Portulaca oleraceaL.)是一种常见的药食兼用的草本植物,现代药理学表明它具有抗氧化、抗肿瘤、免疫调节等多种生物活性,目前已从马齿苋中分离出具有抗肿瘤、抗氧化、抗糖尿病等活性的多糖组分。然而,马齿苋多糖的结构特点及抗氧化活性尚未得到深入研究。本研究在4℃条件下利用“水提醇沉”法从马齿苋中提取多糖,通过单因素试验和L9(34)正交试验对其提取工艺进行了优化,利用Sephadex G-200凝胶柱分离纯化出纯多糖POP,并对其结构特点及抗氧化活性进行了探究,为进一步开发和利用马齿苋提供有效参考。本研究选取的实验原料为新鲜马齿苋,通过单因素和正交试验,优化了 4℃条件下提取马齿苋粗多糖的工艺条件,确定了最佳提取条件为:料液比1:30(g/mL),提取时间13 h,提取次数3次,醇沉浓度80%。在此条件下,马齿苋粗多糖得率为6.76±0.19%。4℃条件下提取的马齿苋粗多糖,使用Sevag试剂去除粗糖中的蛋白质,AB-8大孔吸附树脂去除色素类物质,透析袋去除小分子杂质,Sephadex G-200凝胶柱洗脱获得马齿苋纯多糖POP,其得率为1.86±0.14%,糖含量为95.86±0.21%,糖醛酸含量为30.70±0.16%,说明POP为一种酸性多糖。通过紫外光谱和高效液相色谱分析验证,说明POP为均一多糖,分子量为2.17X 106 Da。通过离子色谱、红外光谱、甲基化、核磁共振、高碘酸氧化和Smith降解分析得POP主要由鼠李糖、阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖、葡萄糖醛酸和半乳糖醛酸六种单糖组成,摩尔比为1:1.780:3.619:0.265:1.365:0.414。存在的连接方式有(1→6)连接的半乳糖,(1→3,6)连接的半乳糖,(1→5)连接的阿拉伯糖,(1→6)连接的葡萄糖,(1→2)连接的鼠李糖和T末端阿拉伯糖。刚果红和圆二色谱实验发现POP中含有三股螺旋结构。扫面电镜结果显示POP呈薄的多孔层状结构,松散的交织在一起。DSC和TGA结果表明POP具有较好的热稳定性。体外抗氧化活性实验表明POP对DPPH自由基、羟基自由基、超氧阴离子自由基和ABTS自由基均有一定的清除能力,且POP对ABTS自由基的清除能力最强,当POP浓度达到3.0mg/mL时,对ABTS自由基清除能力高达92.26±0.12%,与Vc相当。
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