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蔗糖是高等植物中光合同化产物运输的主要形式,对于植物的生长发育至关重要。而植物体内蔗糖的转运主要依赖蔗糖转运蛋白。因此对于蔗糖转运蛋白的研究具有重要意义。本研究通过“三引物PCR”法鉴定出拟南芥蔗糖转运蛋白基因T-DNA插入纯合突变体atsuc6和atsuc9,即AtSUC6<-/->和AtSUC9<-/->,并对其生理特性进行初步研究,探索拟南芥蔗糖转运蛋白基因家族成员.AtSUC6和AtSUC9生理功能的提示信息,为该家族蛋白功能的研究提供参考。
本试验利用“三引物PCR”法鉴定出atsuc6和atsuc9突变体;然后以此为材料比较了atsuc6和atsuc9植株及愈伤组织与野生型在形态学上的差异;并针对atsuc6和atsuc9植株及幼苗根对糖的反应做了观察比较。并以野生型植株及其愈伤组织作为对照,研究了盐胁迫和干旱胁迫处理下atsuc6和atsuc9植株及其愈伤组织部分生理特性的变化。试验结果及结论如下:
1.应用“三引物PCR”法准确鉴定得到纯合突变体atsuc6和atsuc9;
2.在植株形态上,atsuc6与野生型没有明显的差异,而atsuc9与野生型差异较明显,推测AtSUC9对拟南芥植株的形态建成具有较为重要的作用;
3.在愈伤组织形态上,atsuc6与野生型没有明显的差异,而atsuc9与野生型差异较明显,推测AtSUC9对愈伤组织吸收蔗糖起着主要的作用;
4.Atsuc6植株能够利用培养基中的蔗糖,且与野生型没有明显差异;atsuc9虽然也能够利用培养基中的蔗糖,但状况较差,与野生型存在差异;
5.Atsuc6幼苗的根对蔗糖的吸收及生长状况与野生型没有明显差异;而atsuc9幼苗的根对蔗糖的吸收较差并且生长状况较野生型差,推测AtSUC9对拟南芥幼苗根吸收蔗糖起重要的作用;
6.Atsuc6植株与愈伤组织糖含量与野生型差异不明显,进一步证明AtSUC6为假基因。Atsuc9植株叶片和茎中糖含量高于野生型,根和愈伤组织中糖含量低于野生型,推测AtSUC9在叶片中负责外运蔗糖,在茎中负责向库端组织泄出蔗糖,而在根和愈伤组织中负责蔗糖的输入;
7.盐胁迫和干旱胁迫下,atsuc6与野生型差异不大,atsuc9与野生型差异较明显,推测,AtSUC6与拟南芥耐逆性无关,而AtSUC9可能与耐逆性存在一定的关系。