复合SERS基底的制备及其对癌症标志物的检测

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癌症严重威胁到人类的健康和生命,肿瘤标志物的早期检测是提高癌症患者生存率的有效途径之一。表面拉曼光谱增强能够提供检测物质其分子结构特征和物质成分信息,因此能够判断和辨别癌变组织与正常组织之间的结构差异,同时能够实现高灵敏度、高分辨率且快速的检测,从而有望用于癌症的早期诊断。文献研究表明,肌氨酸可激活前列腺癌细胞,并且其在尿液中被检测到意味着恶性前列腺癌的发生。胞苷该物质作为一种人体内重要的调节因子,在各组织和器官的生理活动过程中扮演十分重要的作用。据研究表明,胞苷作为结肠癌症的潜在生物标志物,对人体中的胞苷定量检测可以有效的监测体内癌症水平。唾液酸(N-乙酰基神经氨酸),为N-乙酰神经胺酸或任何其酯或其醇羟基的衍生物,在发生各种炎症性疾病及恶性肿瘤病时增高,如肺癌、肝癌、胃癌、肠癌、卵巢癌等。目前,针对不同检测样品的检验方法有气相色谱法(GC)、高效液相色谱法(HPLC)、质谱联用法(GC-MS)、液相色谱—质谱联用法(LC-MS)等。这些传统的检测方法具有较好的准确度和重现性,但同时也具有样品前处理复杂和仪器设备庞大、灵敏度低等缺点,因而不适合现场快速分析检测。与传统的拉曼光谱相比,表面增强拉曼光谱(SERS)在用于痕量样品的分析检测中发挥了重要作用。它不仅克服了其低灵敏度的缺点,而且能够提供结构特征性强的分子水平信息。其中,制备增强拉曼信号的SERS基底是表面增强拉曼光谱应用的一个重要环节。贵金属纳米粒子由于其固有的表面等离子体共振效应,金、银纳米粒子常作为SERS增强基底。磁性材料具有较好的富集、分离功能,在制备纳米粒子的过程中加入磁性纳米颗粒可以有效地提高待测物的检测灵敏度。本文进行尝试性研究,将拉曼光谱技术应用于癌症标志物检测中,对尿液中肌氨酸、胞苷,血清中的唾液酸进行测定,试图建立一种简便、快速的癌症标志物检测新方法,进一步扩大拉曼光谱的使用范围,为拉曼光谱在疾病健康检测发展中打下良好基础。主要研究内容和结果如下:1、通过β-巯基乙胺连接金、银纳米粒子合成双金属SERS增强基底,对尿液中肌氨酸进行测定,其检测的线性范围在1.0 mmol/L到50μmol/L之间(R2=0.9740),最低检测浓度达10-88 M。2、通过引入四氧化三铁磁性材料原位合成磁性复合材料,该方法稳定性及灵敏度良好,用于检测尿液中的胞苷,检测的线性范围在1.0×10-44 mol/L到1.0×10-3mol/L间,RSD为0.71.3%。3、引入巯基苯硼酸修饰原位还原所得的磁金纳米材料对挥发血清中唾液酸进行检测,实现酸、碱环境下可逆检测血清中的唾液酸,该方法简单快捷。本论文研究结果表明,采用拉曼光谱技术对尿液中肌氨酸、胞苷,血清中唾液酸进行检测,实验结果较理想,具有一定的现实推广价值。证明拉曼光谱能够作为一种快速、无损、安全的检测技术,在疾病健康检测中具有一定的应用前景和市场潜力。
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