【摘 要】
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目的:研究骨髓间质干细胞体内外免疫调节的作用及其机制。 方法:从胚胎及Wistar大鼠股骨中分离培养间质干细胞,经克隆化分选出形态均一的细胞,用流式细胞术检测其表面标志
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目的:研究骨髓间质干细胞体内外免疫调节的作用及其机制。 方法:从胚胎及Wistar大鼠股骨中分离培养间质干细胞,经克隆化分选出形态均一的细胞,用流式细胞术检测其表面标志以鉴定其纯度。将分离培养的骨髓间质干细胞接种于96孔板,待其长满孔面积的80%～90%时用直线加速器以30GY剂量照射,然后与分离的外周血淋巴细胞共培养3d,以单独培养的淋巴细胞为对照,加入ConA刺激68h,分别使用MTT法和~3H-TdR法检测MSCs对外周血淋巴细胞增殖反应的影响。采用RT-PCR和Real-time PCR检测经MSCs处理的人外周血淋巴细胞TGF-β1、IL-6、IL-8、IL-10的基因表达,以未经MSCs处理的同一人外周血淋巴细胞标本作对照。将SD大鼠的真皮移植到Wistar大鼠创口上,加压包扎,同时将2×10~6的Wistar大鼠MSCs经尾静脉注射到Wistar大鼠体内,以经同样手术处理而不注射MSCs的Wistar人鼠为对照。无菌分离Wistar大鼠外周血及脾脏淋巴细胞,并用Wistar大鼠MSCs及ConA处理,以ConA单独处理的Wistar大鼠淋巴细胞为对照。将2×10~6的MSCs在不同的时间点经尾静脉注射到Wistar大鼠体内,在每次注射前经尾静脉采血测定外周血中CD4+、CD8+淋巴细胞占整个淋巴细胞数量的比值。 结果:MSCs对ConA刺激的淋巴细胞增殖的影响与MSCs和淋巴细胞的比值有关,当比值较大时MSCs对ConA刺激的淋巴细胞增殖有明显的抑制作用,但是比值较小时反而会促进其增殖。MSCs对淋巴
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