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益生菌是指可以改善宿主肠道微生态平衡,并且含有生理性的活菌的微生物,益生菌作用的好坏取决于菌种的选择。 粘附是微生物与宿主肠道相互作用的第一步,也是进入肠道的微生物发挥作用的前提。益生菌必须粘附于宿主肠道,才能与正常菌群一起构成生物屏障,通过定植保护作用影响过路菌或者外袭菌的定植、占位和繁殖,并且,益生菌还可以在宿主体内产生生物酶、活性肽以及一些代谢产物如有机酸、过氧化氢、细菌素等物质可以阻止或杀死致病菌在体内的定植,发挥化学屏障作用,因此,益生菌的粘附性能就成为益生菌菌株质量评定的重要指标之一。目前国内外的微生态制剂品种比较多,但是对这些制剂中益生菌的粘附性能方面的系统检测资料尚比较缺乏。 本课题拟对目前我国国内市售的5种微生态制剂中10株益生菌的粘附性能进行系统检测,从而为其作用基础提供实验资料。 方法:(1)采用革兰氏染色法,检测益生菌对体外培养的HT-29细胞的粘附能力。(2)益生菌与辣根过氧化物酶标记的粘蛋白共孵育后,DAB显色,即采用ELISA法测定492nm的OD值反映益生菌对粘蛋白的粘附能力。(3)益生菌和致病菌一起与细胞共孵育后,蒸馏水裂解细胞释放粘附其上的细菌,利用致病菌的选择性培养基计数,反映致病菌的粘附率的方法检测了10株益生菌对致病性大肠杆菌(EPEC)的粘附抑制性能,体外检测了益生菌对致病菌的拮抗作用。 结果:(1)3种方法的综合评价结果显示,在所检测的10株益生菌中,其粘附性能的综