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高危型人乳头瘤病毒(Human Papillomavirus,HPV)病毒感染被认为是引起女性宫颈癌的主要原因。流行病学调查显示98%的宫颈癌都是由人乳头瘤病毒(HPV)感染引起,其中约70%是由HPV16或HPV18引起。因此,开发一种安全,有效的HPV18疫苗对于预防宫颈癌具有重大的意义。首先,本研究构建了高效HPV18L1蛋白大肠杆菌原核表达系统。利用该表达系统,HPV18 L1蛋白能够以可溶性形式表达,保留了其天然的表位。其次,本研究还还针对大肠杆菌来源的HPV18 L1蛋白建立了一套高效,易于放大的纯化工艺,以及类病毒颗粒体外组装工艺。根据该工艺所制备的HPV18VLPs疫苗纯度达到98%以上,各项鉴定指标均符合药典要求。且动物实验显示,该疫苗具有高度的免疫原性,在实验动物体能能诱导高滴度的HPV18中和抗体。本研究在成功制备HPV18 VLPs疫苗的基础上,利用假病毒中和模型,一共鉴定出HPV18中和单抗6株,而后通过阻断实验进一步确定了优势中和单抗11A9以及3C3。为了进一步阐明11A9单抗的中和机制,结合位点,在本研究对HPV18 VLPs进行了冷冻电镜观测,初步了解HPV 18 VLPs的结构模式。此外,还进一步制备了11A9-HPV18 VLPs抗原抗体复合物以备进一步进行冷冻电镜研究。总之,本研究利用大肠杆菌表达系统制备了一种廉价,有效的HPV18 VLP疫苗,对HPV18的中和单抗进行鉴定,并且对于HPV18优势单抗11A9的中和机制,结合位点进行了初步探索,为将来进行HPV18疫苗的分子设计提供了参考。