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目的:1.探讨砂生槐种子乙醇提取物(Ethanolic Extracts from Sophora Moorcroftiana Seeds,EESMS)对人舌鳞癌Tca8113细胞增殖抑制率的影响。2.探讨EESMS对Tca8113细胞株细胞周期的影响。3.探讨EESMS对Tca8113细胞凋亡的影响。4.应用蛋白质组学方法探讨EESMS诱导Tca8113细胞凋亡的机制。方法:观察EESMS对Tca8113细胞增殖率的抑制作用并筛选药物浓度。采用AO/EB双重染色法在荧光显微镜下进行形态学观察,区分活细胞、早期凋亡细胞、晚期凋亡细胞及坏死细胞。Annexin V/PI双染、流式细胞术检测EESMS处理后Tca8113细胞的凋亡率。利用流式细胞术检测细胞周期分析EESMS处理后的细胞周期变化情况。利用双向电泳和Maldi-TOF-TOF质谱鉴定技术分析加药组与对照组差异蛋白,探究砂生槐的作用机制。结果:1.36 h MTT比色法显示:加药组细胞增殖较对照组明显受到抑制,且呈现浓度依赖性,其中0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5和4.0μg/μl组细胞生长抑制率(%)分别为:4.12±0.94,6.57±2.49,27.69±1.32,46.77±2.74,57.07±0.69,69.74±1.94,82.29±3.37和98.71±0.46,上述差异均具有统计学意义。药物的半数抑制率IC50为2.085μg/μl。2.AO/EB双染结果显示:对照组无明显凋亡细胞,1.0μg/μl浓度组可见早期凋亡细胞,随药物浓度增高,早期凋亡细胞及晚期凋亡细胞增多。3.流式细胞术细胞周期检测显示:随药物浓度增高加药组细胞G0/G1期细胞比例逐渐增大,S期、G2/M期细胞比例逐渐减小,加药组细胞周期阻滞于G0/G1期。4.Annexin V/PI双染细胞凋亡检测显示:统计学分析显示加药组细胞凋亡率明显高于阴性对照组(P<0.05),随药物浓度增高,凋亡细胞比例增加,呈浓度依赖性。5.双向电泳技术共发现218个差异蛋白。经Maldi-TOF-TOF质谱技术成功鉴定差异蛋白8个,包括:肽脯酰胺顺反异构酶A、活化蛋白激酶1受体、乳酸脱氢酶B链异构体、磷酸甘油酸变位酶1、Dj-1蛋白晶体结构A链、过氧化还原酶2、丝氨酸蛋白酶抑制剂B5及核内不均一核糖核蛋白H。经过生物信息学分析,上述蛋白涉及细胞氧化应激反应、基因表达负向调控、细胞粘附、凋亡诱导负向调控、氧化还原进程、蛋白分泌正向调控等多种生物功能。结论:EESMS能显著抑制Tca8113细胞的增殖,诱导Tca8113细胞凋亡,并影响其细胞分裂周期,其机制可能与细胞氧化应激反应、基因表达负向调控、细胞粘附、凋亡诱导负向调控、氧化还原进程、蛋白分泌正向调控等多种生物功能有关。