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慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染是导致终末期肝病和肝细胞癌最重要的致病因素之一。果糖二磷酸醛缩酶(ALD)是一种普遍存在的四聚体结构糖酵解酶,在糖酵解和糖异生过程中起着重要作用。它能可逆性催化裂解果糖-1,6-二磷酸(FBP)或果糖-1-磷酸(F1P)分别生成磷酸二羟丙酮和3-磷酸甘油醛。在实验室的前期研究中,我们利用酵母双杂交技术筛选出果糖二磷酸醛缩酶B(ALDOB)为乙肝表面抗原(HBs)的候选结合蛋白之一,这种相互结合在肝癌发生发展中所起的作用正是我们研究的重点内容。
在本研究中,我们旨在确认ALDOB为HBs的结合蛋白并研究在肝细胞癌(HCC)的发生发展过程中二者结合的功能及相互作用机制。我们观察到,在体外实验中,外源性和内源性免疫共沉淀提示ALDOB蛋白与HBs共结合且共定位于细胞浆中。ALDOB与乙肝表面抗原HBs蛋白结合能抑制顺铂诱导肝癌细胞HepG2凋亡。此外,western-blot实验表明二者结合能增强AKT和下游GSK-3β蛋白的磷酸化效应;在HepG2细胞中下调促凋亡蛋白Bax,Bid,Bim,Puma的表达和上调抗凋亡蛋白Bcl-2和Mcl-1的表达。
通过上述研究我们发现,醛缩酶B与乙肝表面抗原HBs蛋白结合能够抑制HepG2细胞凋亡,增强AKT和下游GSK-3β蛋白磷酸化水平,改变Bcl-2家族蛋白的表达。醛缩酶B(ALDOB)与乙肝表面抗原(HBs)相互作用可能被应用HBV相关性肝炎或肝癌的治疗过程中作为一个潜在的治疗靶点。