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目的:本研究通过静脉移植骨髓间充质干细胞(Bone marrow-derived mesenchymal stem cells,BMMSCs)到重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)相关肺损伤的SD大鼠中,观察BMMSCs对SAP相关肺损伤的治疗效果,并探讨其是否可以通过上调肺组织中ZO-1和Occludin的表达来改善肺毛细血管渗漏及其机制的研究,为BMMSCs治疗SAP相关肺损伤提供理论依据。方法:1、通过全骨髓贴壁分离培养法在体外分离、纯化和培养骨髓间充质干细胞,将P3 BMMSCs经流式细胞仪分析干细胞表面的标志物CD34-、CD45-、CD29+、CD90+,并结合所观察细胞的形态来鉴定所培养的BMMSCs;2、通过逆行胰胆管注射脱氧牛黄胆酸钠法来建立SAP相关肺损伤SD大鼠模型,假手术组SD大鼠仅轻轻翻动胰腺、关腹即可。将105只雄性SD大鼠随机分成假手术组(SO组);SAP组;BMMSCs干预组;后两组再按处死时间不同分为6h、12h和24h组。每组中随机选取5只大鼠用于Evans blue检测肺毛细血管通透性;3、在相应时间点处死大鼠,观察各组胰腺、肺组织的病理形态;检测血清肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和白介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)的变化;检测肺组织的湿干重比值(W/D)、肺毛细血管的渗漏情况;通过Western-blot、RT-PCR检测肺组织中ZO-1、Occludin蛋白和mRNA的改变情况。结果:1、经全骨髓贴壁分离培养法获得的BMMSCs的形态为成纤维细胞样、长梭形,经流式细胞仪鉴定,CD34-1.9%、CD45-0.3%、CD29+99.8%、CD90+99.8%。2、胰胆管逆行注射脱氧牛黄胆酸建立SAP相关肺损伤SD大鼠模型,肺组织可见结构紊乱、间质水肿增厚、肺泡萎陷和炎症细胞浸润等变化,说明模型建立成功。3、与SO组相比,SAP组各时间点肺、胰腺的病理改变明显;肺毛细血管的通透性明显增加(P<0.05);肺组织湿干比值增加(P<0.05);血清中TNF-α和IL-1β水平明显增加(P<0.05);肺组织ZO-1、Occludin蛋白和mRNA表达明显降低(P<0.05)。静脉移植BMMSCs后,各时间点肺组织、胰腺的病理改变减轻;肺毛细血管通透性改变减轻;肺组织湿干比值降低;血清中TNF-α和IL-1β水平降低;肺ZO-1蛋白和mRNA表达在12h和24h明显升高(P<0.05);肺Occludin蛋白和mRNA在各时间点均明显增高(P<0.05)。结论:BMMSCs可以改善SAP大鼠的炎症反应,降低肺毛细血管的通透性,减轻肺水肿,对SAP大鼠相关肺损伤有治疗效果。这其中的机制可能是BMMSCs通过抑制炎症反应,提高了紧密连接蛋白ZO-1和Occludin的表达,使肺组织毛细血管内皮屏障功能的完整性得以维持,从而减轻了肺水肿,减轻了SAP相关肺损伤。