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目的:癌干细胞（CSC）也称为肿瘤干细胞,它的发现使人们对肿瘤的发生发展有了全新的认识。根据癌干细胞理论,结直肠癌干细胞可能来源于正常肠干细胞的突变。所以,通过确定细胞的起源（来自的干细胞或祖细胞）,可以间接确定癌干细胞的来源;通过癌干细胞表达特异性标记物的研究,可以确定癌干细胞存在的部位及数量;通过研究癌干细胞在结直肠癌中表达的生物学特点及其临床病理特征与预后的关系,可以为特效药物筛选靶向治疗和临床治疗方案的确立提供重要的科学依据。乙醛脱氢酶 1（ALDH1）,属于细胞氧化作用的解毒酶类,它是干细胞与癌干细胞共同表达的标记物。CD133（也称为Prominin-1或AC133）是一个具有865个氨基酸的5-跨膜糖蛋白,研究表明,通过CD133单克隆抗体标记,可以在部分脑瘤、前列腺癌、肝癌、胰腺癌、肺癌、结肠癌组织中分离出癌干细胞。而且,CD133阳性细胞亚群,表现出了明显增强的致瘤的潜力。中药砒霜的主要成分是As203,有研究证明它具有促进肿瘤细胞分化、抑制肿瘤血管生成和肿瘤细胞增殖的作用。本实验通过免疫组化和免疫荧光方法联合标记,对ALDH1和CD133在大肠癌组织中的表达程度、分布特点、病理学特征、临床分期及预后的关系等进行研究与探索,同时在结直肠癌原代细胞培养中加入中药As203,观察其对结肠癌细胞及癌干细胞增殖与分化的影响,为临床有效治疗大肠癌,提高患者的生存期提供可靠的资料。方法:通过间接荧光抗体染色法（IFAS）和免疫组织化学方法（IHC）对肠癌组织腊块进行染色,研究ALDH1和CD133蛋白表达与临床病理参数之间的关系。通过Kaplan-Meier方法对ALDH1和CD133阳性与阴性表达的大肠癌患者生存期和预后进行比较与分析,并通过Spearman相关性分析探讨大肠癌组织中ALDH1和CD1 33表达的相关性。对临床预后较差的直肠癌患者,单纯分析ALDH1阳性和阴性表达与直肠癌患者生存期的关系及病理学特点。同时对大肠癌新鲜组织进行原代细胞培养,通过特异性标记物ALDH1对肿瘤干细胞进行鉴定,并在肿瘤细胞培养液中加入中药砒霜（As203）,研究它对大肠癌细胞及癌干细胞生长及生物学特征的影响。用蛋白印迹法（WB）和酶联免疫吸附试验（ELISA）检测新鲜肿瘤组织中ALDH1蛋白表达峰度。结果:与正常大肠组织相比,大肠癌组织中ALDH1蛋白表达水平明显升高。肿瘤细胞的分化程度和ALDH1的表达有明显的相关性,肿瘤的细胞分化程度越差,ALDH1的染色强度越高。同时在TNM分期与Duke’s分期中,与低临床分期的肿瘤相比,高分期的肿瘤表达ALDH1显著,其表达与肿瘤淋巴结转移无关。生存期分析显示在大肠癌和直肠癌组织中,ALDH1阳性表达的患者比阴性表达的患者生存期短。通过大肠癌组织原代细胞培养及ALDH1标记,证实肿瘤干细胞存在,但因数量极少,ALDH1蛋白印迹显示阴性。培养液中加入砒霜对肿瘤细胞的生长有明显的抑制作用,增加了癌干细胞的密集程度。通过ELISA定量试验证实,相对于正常大肠组织,新鲜结直肠癌组织匀浆中ALDH1含量明显增高。与正常大肠蜡块组织相比,大肠癌蜡块组织中CD133的蛋白表达较高,CD133的表达特点同样与大肠癌的临床分期有关,但是它的表达与肿瘤细胞分化无关,却与局部淋巴结转移有关。与CD133表达阴性的大肠癌患者相比,CD133阳性表达者生存时间较差。研究表明ALDH1与CD133的表达具有明显的相关性。结论:研究证明,结直肠癌组织中含有较高浓度的ALDH1。ALDH1的表达与肿瘤的临床分期和肿瘤的分化程度有明显的相关性,可作为有价值的参数进行病理学特性鉴定和生存期评估。CD133与病人临床分期及局部淋巴结转移密切相关,也可作为预后评价的重要参考因素。ALDH1 与CD133联合标记可作为特异性的标记物鉴定人结直肠癌干细胞。中药砒霜具有抑制结直肠癌细胞的生长的作用,并能阻止癌干细胞向癌细胞的分化,可作为临床有效的结直肠癌治疗药物,同时应用砒霜（As203）可增加肿瘤干细胞的密集程度,提高纯化效率,为下一步分离、提纯癌干细胞奠定重要的基础。