宫颈癌是女性生殖系统发病率最高的恶性肿瘤。云南是宫颈癌高发地区,该地区位于祖国的西南边陲,高原、雪山、河谷等地形地貌复杂、气候多变、地域辽阔、经济发展不平衡、医疗教育资源和水平分布不均、26个民族大杂居小聚居、各民族生活习惯不同。本课题组前期研究调查发现:HPV的流行具有种族和地域差异,在云南不同地区的不同少数民族,女性HPV感染率不尽相同:位于西南河谷地带的独龙江地区独龙族感染率最高(27.8%),位于西北高海拔寒冷的香格里拉地区的藏族次之(27.4%),随后为位于东南低海拔湿热的红河地区的哈尼族(21.5%)、丽江地区的纳西族(11.9%),南方低海拔湿热的西双版纳地区傣族HPV感染率最低(9.9%)。此外,各个民族多重感染有差异,有单一感染、二重感染、三重感染、四重感染等情况,在独龙族中发现了五重感染。前期研究证明:云南环境的多样性,导致本地区的宫颈癌致病原——人乳头瘤病毒(HPV)流行具有多样性,不同民族人群对HPV及其相关知识的认知存在差异。但是,云南地区环境多样,不同的人群对HPV及其相关知识的认知存在哪些差异?HPV感染导致宫颈癌变患者中,HPV的流行情况如何?被感染后机体阴道微生态发生了怎样的变化,尤其是该地区所流行的HPV亚型众多,不同的HPV亚型感染会对阴道微生态产生怎样的影响?目前,尚缺乏以上几个方面的研究。因此,本课题旨在全面了解该地区适龄女性HPV的认知情况,并系统研究癌前病变和宫颈癌患者中HPV亚型分布,利用16SrDNA高通量测序技术,对云南地区健康人群(control group)、HPV感染后慢性宫颈炎人群(HPV group)、I度宫颈上皮内瘤变人群(CINI group)、II度宫颈上皮内瘤变人群(CINII group)、III度宫颈上皮内瘤变人群(CINIII group)、宫颈癌人群(CC group)的阴道菌群进行测序,分析菌群结构和差异,同时分析HPV亚型与阴道微生态的关系。首先,通过认知问卷调查,我们发现云南地区的女性对HPV及其相关知识的认知度偏低,听说过HPV疫苗的人群不足20%,提示我们加强HPV、宫颈癌相关知识的科普教育和疫苗宣传工作十分必要。分析2012年11月至2015年12月就诊于云南省第一人民医院的511例宫颈上皮内瘤变和宫颈癌患者HPV感染情况和亚型分布,我们发现:整体而言,HPV DNA阳性率高达73.3%,共检测出23个HPV亚型,高危亚型14个,低危亚型9个;宫颈上皮内瘤变和宫颈癌患者中,疾病严重程度不同,HPV的感染率和亚型分布存在差异,CINI和CINII患者中分别检测23、16个亚型,最常见亚型为HPV-52;CINIII和CC患者中分别检出18、19个亚型,最常见亚型为HPV-16;而且,在汉族女性中,病变程度不同,优势型别不同,但少数民族女性不论是CINI、CINII、CINIII和CC,优势型别均为HPV-16。16SrDNA测序显示,宫颈病变的程度不同,阴道微生物群落结构不同。宫颈病变的发生发展与阴道菌群结构改变之间存在相关性。随着宫颈病变的发生发展,阴道菌群呈现出Lactobacillus逐渐减少、多样性逐渐増加的趋势。在感染HPV早期,Bacillus velezensis和Yersinia pestis的相对丰度显著増加,Lactobacillus急剧减少,这两者的协同作用可能是机体内HPV长期存在而致瘤变的因素之一。HPV E6/E7 mRNA阳性表达对阴道微生态的结构和功能影响不明显。针对HPV亚型和阴道微生态关系的研究发现:多重感染患者阴道微生态α多样性低于单一感染者,而且阴道微生态的多样性和HPV亚型相关。Lactobacillus的比例不仅与HPV感染相关,而且与HPV亚型的组合相关,多重感染组中该菌属占比最低。对于单一感染组,在高危型HPV感染个体中乳酸杆菌的占比较低危HPV感染组低。综上所述,本研究针对云南女性进行HPV相关知识的认知度调查,了解当地人群对HPV、宫颈癌、宫颈癌疫苗的认知水平,为HPV筛查、感染预防和疫苗推广奠定基础;探求不同级别的宫颈癌前病变和宫颈癌患者的HPV流行情况,阐明该人群中的HPV基因亚型分布;利用16SrDNA高通量测序技术,揭示了健康人群和HPV感染后不同程度宫颈病变人群的阴道微生态以及HPV亚型与阴道微生态的关系,为后续通过调整阴道微生态治疗HPV感染和宫颈病变提供参考。本研究有助于HPV感染导致的宫颈癌前病变和宫颈癌的预防及治疗方案的制定,具有为后续研究和临床实践提供借鉴和参考意义。